臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)說(shuō)明書
貨號(hào): CC1180
規(guī)格: 50mL/100mL
保存: 4℃保存,有效期12個(gè)月
產(chǎn)品說(shuō)明:
臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)或稱臺(tái)盼蘭、錐蟲藍(lán),是細(xì)胞活性染料,常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性與細(xì)胞的存活率,是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠排斥臺(tái)盼藍(lán),細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色;而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失,即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬,故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。臺(tái)盼藍(lán)染色后,通過(guò)顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù),就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。染色時(shí)間只需 3-5 分鐘,操作簡(jiǎn)單。
使用說(shuō)明:
1. 收集細(xì)胞:
用胰酶和/或 EDTA 消化貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞可直接收集。收集細(xì)胞時(shí)用1000-2000rpm離心1分鐘,棄上清,制備單細(xì)胞懸液,并做適當(dāng)稀釋。
2. 臺(tái)盼藍(lán)染色:
細(xì)胞懸液與0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液以9:1比例混勻(終濃度0.04%),染色3分鐘 (染色3分鐘時(shí)間已經(jīng)足夠,但染色時(shí)間可以更長(zhǎng)一些,但不宜超過(guò)10分鐘) 。
3. 細(xì)胞計(jì)數(shù):
吸取少量經(jīng)過(guò)染色的細(xì)胞,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大,無(wú)光澤;活細(xì)胞不著色并保持正常形態(tài),有光澤。通常要比較精確地進(jìn)行定量,每個(gè)細(xì)胞樣品至少數(shù)500個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞存活率(%)= 活細(xì)胞總數(shù)/(活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù))×100%
注意事項(xiàng):
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