臺盼藍染色液(0.4%)說明書
貨號: CC1180
規(guī)格: 50mL/100mL
保存: 4℃保存,有效期12個月
產(chǎn)品說明:
臺盼藍(Trypan Blue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍,是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性與細胞的存活率,是組織和細胞培養(yǎng)中最常用的死細胞鑒定染色方法之一。正常的活細胞細胞膜結構完整,能夠排斥臺盼藍,細胞不會被染成藍色;而喪失活性或細胞膜不完整的細胞可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失,即可認為細胞已經(jīng)死亡。臺盼藍可被巨噬細胞吞噬,故可用于巨噬細胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺盼藍拒染現(xiàn)象。臺盼藍染色后,通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù),就可以對細胞存活率進行比較精確的定量。染色時間只需 3-5 分鐘,操作簡單。
使用說明:
1. 收集細胞:
用胰酶和/或 EDTA 消化貼壁細胞,懸浮細胞可直接收集。收集細胞時用1000-2000rpm離心1分鐘,棄上清,制備單細胞懸液,并做適當稀釋。
2. 臺盼藍染色:
細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液以9:1比例混勻(終濃度0.04%),染色3分鐘 (染色3分鐘時間已經(jīng)足夠,但染色時間可以更長一些,但不宜超過10分鐘) 。
3. 細胞計數(shù):
吸取少量經(jīng)過染色的細胞,用血細胞計數(shù)板計數(shù)。死細胞著藍色并膨大,無光澤;活細胞不著色并保持正常形態(tài),有光澤。通常要比較精確地進行定量,每個細胞樣品至少數(shù)500個細胞。
細胞存活率(%)= 活細胞總數(shù)/(活細胞總數(shù)+死細胞總數(shù))×100%
注意事項:
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