通用型全基因組擴增試劑盒(WGA)

產品及特點 本產品是用于基因組DNA擴增全基因組的試劑盒，可以方便、簡單、快速、經濟的得到穩(wěn)定產量的基因組DNA擴增樣品。本產品有如下優(yōu)點：

1. 基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超強鏈取代能力。

2. 可以擴增基因組達上萬倍，具有高產量和高保真性的特點。

3. 可使用各種來源的樣品，包括全血，干血，發(fā)根，口腔粘膜刮液培養(yǎng)細胞，真菌和病毒等。

4. 操作簡便快捷，恒溫（30℃）反應，無須PCR儀即可實現擴增。

5. 產物可用于多種后續(xù)試驗，包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構建、單倍型分析、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析（片段差異，微衛(wèi)星差異，SNP，STR）等。

6. 本產品只能用于科研。
規(guī)格及成分 成 份 編 號 十孔盒包裝
WGA 溶液 A 100941a 250 μL（白蓋）
2×WGA 溶液 B 100941b 300 μL（藍蓋）
phi 29 DNA 聚合酶（10U/μL） 100941c 25 μL（紅蓋）
使用手冊 100941sc 1 份

自備試劑 超純水（無 DNA 和 DNase 污染）

運輸及保存 低溫運輸、-20℃保存, 有效期一年。

使用方法本產品適用于純化好的基因組DNA。

一、模板變性

1. 在PCR塑料管中加入9μL WGA溶液A，加入1μL純化好的基因組DNA模板（DNA含量好在10ng-100ng之間）。

2. 在PCR儀器上95℃3分鐘變性模板DNA。注意：必須打開熱蓋。

3. 冰上放置待用。

4. 加入10 μL 2×WGA溶液B，輕柔吹打混勻。

5. 加入1 μL phi 29 DNA聚合酶（10U/μL），輕柔吹打混合均勻。

6. 30℃保溫10-12小時。好使用PCR儀進行30℃保溫并打開熱蓋保溫。如果采用30℃水浴，好在樣品管中加入30-50μL石蠟油以防水分蒸發(fā)，因為30℃長時間的水浴也能使水分蒸發(fā)到管壁，從而改變反應體系中各成分的濃度、降低WGA反應效率。如果模板DNA量比較高，WGA三小時即可檢測到DNA擴增。

7. 65℃保溫20分鐘使phi29 DNA聚合酶徹底滅活，然后-20℃長期放置或立即

使用。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以強烈推薦反應結束后65℃保溫20分鐘以將酶徹底滅活以免其干擾后續(xù)反應或長期保存時其降解DNA。