銀染清除劑
產(chǎn)品及特點(diǎn)銀染是目前最靈敏的非同位素蛋白質(zhì)和核酸染色技術(shù)，對(duì)銀染后的條帶進(jìn)行原 位酶切（in-gel digestion）和后續(xù) MS 分析是蛋白組學(xué)研究的重要手段。大量研 究表明如果預(yù)先對(duì)銀染條帶進(jìn)行去除銀粒子的處理，則原位酶切更加有效，MS 靈 敏度更高。目前最常用的脫銀粒子清除方法（如鐵氰酸鉀/硫代硫酸鈉法、硫酸銅/ 硫代硫酸鈉法）的主要缺點(diǎn)是引入的金屬離子會(huì)影響后續(xù)反應(yīng)、有的成分還有毒性 (如鐵氰酸鉀)、工作液極不穩(wěn)定。為克服這些缺點(diǎn)，本公司開發(fā)了無毒環(huán)保的新型 銀粒子清除劑，它具有下列特點(diǎn)：

1. 高效，5 分鐘處理即可清除 PAGE 膠中銀染留下的銀粒子。

2. 成分不含金屬離子，跟原位酶切和質(zhì)譜分析（包括 MALDI-TOEMS）等后續(xù) 反應(yīng)高度兼容，脫銀后 PAGE 膠還可以再次銀染或考染。

3. 成分無毒環(huán)保，保障研究人員和環(huán)境的安全。

4. 既可用于蛋白質(zhì)銀染后的脫銀，也可用于核酸銀染后的脫銀。

5. 即開即用，使用非常方便，不需要配制各種溶液。
銀染清除劑
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 30 次紙盒包裝
銀染清除劑溶液 A 100603A 100 mL
銀染清除劑溶液 B 100603B 1 mL 棕色管
使用手冊(cè) 1 份

銀染清除劑運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。

使用方法

1. 銀染后，切下含所需蛋白條帶的 PAGE 膠條用自備的去離子水搖晃浸泡 2 次， 每次 5 分鐘以去除電泳緩沖液。注意：不要使用整塊 PAGE 膠。

2. 用干凈鑷子將膠條轉(zhuǎn)移到 5-10 mL 的容器中（如 5 mL 的塑料管或 10 mL 的 細(xì)菌培養(yǎng)管），加入 1 mL 溶液 A，搖晃 5 分鐘，去掉溶液 A。

3. 再加入 1 mL 溶液 A，搖晃 5 分鐘，去掉溶液 A。

4. 加入 1mL 溶液 B 工作液，搖晃直到顏色脫去（一般不到 20 分鐘）。溶液 B 工作液配制方法：將 33uL 溶液 B 加入到 1mL 的溶液 A 中混合均應(yīng)，現(xiàn)用 現(xiàn)配。

5. 取出脫色后的膠條，在去離子水中搖晃浸泡二次，每次 5 分鐘。

6. 膠條可以直接用于后續(xù)的再染色或質(zhì)譜分析（需要先甲酸酸化和脫水處理）。 附：蛋白膠條質(zhì)譜分析流程（僅僅供參考，本試劑盒不提供相關(guān)試劑）

1. 用 1%甲酸浸泡脫銀后的膠條 2 次，每次 5 分鐘。

2. 用水-乙腈-甲酸混合液（49.5:49.5:1）浸泡 5 分鐘。

3. 用乙腈浸泡 5 分鐘。真空干燥去除殘留水分。

4. 將膠條置于含 8 ng/uL Trypsin 的 25 mM 碳酸銨溶液中浸泡 30 分鐘。

5. 去除多余溶液，加入 20 uL 25 mM 碳酸銨溶液，37℃保溫 8 小時(shí)。

6. 加 10 uL 10%甲酸終止反應(yīng)。收集溶液（含有酶解的蛋白產(chǎn)物）。

7. 用水-乙腈-甲酸混合液（49.5:49.5:1）浸泡 10 分鐘，收集溶液。

8. 用乙腈浸泡 10 分鐘，收集溶液。匯集上面三步收集的溶液，真空干燥。

9. 將干燥的多肽溶解于水-乙腈-甲酸混合液（49.5:49.5:1）中，并 1:1 與 10mg/mL 的α-氰基-4-羥基肉桂酸溶液（α-Cyano-4-hydroxycinnamic acid）混合，此溶液溶劑為水-乙腈-甲酸混合液（49.5:49.5:1），然后直接用 于 MALDI-TOFMS 分析。