動植物總蛋白微量提取試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn)
本產(chǎn)品用于快速提取動植物總蛋白，用于 SDS-PAGE 凝膠電泳和 Western
印跡分析以及蛋白活性測定等。本產(chǎn)品的其主要特點(diǎn)是：
1. 提取過程十分簡便，勻漿離心即可，整個過程只需要十幾分鐘。
2. 采用獨(dú)特的溫和裂解成分，蛋白保持天然活性。
3. 適用于各種動植物組織材料，包括新鮮或冰凍的材料。
4. 得到的提取物可以直接用于 SDS-PAGE、2D 電泳、Western 印跡分析以及
蛋白活性測定等下游實(shí)驗(yàn)。
5. 一次可以處理 100mg 左右的樣品，足夠進(jìn)行幾十次 SDS-PAGE mini 膠電泳
檢測。
動植物總蛋白微量提取試劑盒運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存，但收到貨后 5×SDS-PAGE 上樣液需-20℃保存，頻繁使用時可
以放 4℃保存，產(chǎn)品有效期為出廠后一年。
使用方法
使用前，請?jiān)趧又参锟偟鞍孜⒘刻崛∪芤?A 中加入自備的、新鮮配制的 1M
DTT 溶液 50uL。
一：勻漿法
注意：對致密的實(shí)體組織（如肌肉），用 Polytron 剪切式勻漿機(jī)勻漿處理。
1. 稱取動物或植物組織樣品 100 mg，剪刀剪成黃豆大小，轉(zhuǎn)移到 10-15 mL 的塑料離心管中。
2. 加入 1mL 動植物總蛋白微量提取溶液 A，在冰上用 Polytron 剪切式勻漿機(jī)勻漿，直到?jīng)]有肉眼可見的組織塊。為了避免產(chǎn)熱，可以分多次勻漿，其間放冰上讓勻漿液冷卻。
3. 將勻漿液全部轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 的塑料離心管中。
4. 4℃ 12,000 g 離心 10 分鐘，組織殘?jiān)槠瑢⑿纬沙恋怼?/p>
5. 將上清液轉(zhuǎn)移至一新的 1.5 mL 塑料離心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要進(jìn)行 SDS-PAGE 電泳，可取部分到離心管中，加入 5×SDS-PAGE 上樣緩沖液使其終濃度為 1×（加入樣品體積的 1/4 即可，40uL 樣品加入 10uL 5×SDS-PAGE 上樣緩沖液），在沸水中水浴 5 分鐘后立即上樣電泳。
二：直接研磨法
注意：可以使用玻璃和陶瓷的研缽，也可以使用與微量離心管式的研磨杵
1. 稱取動物或植物組織樣品 100 mg，剪刀剪成黃豆大小，轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的研缽或離心管中。
2. 加入 1mL 動植物總蛋白微量提取溶液 A，用研磨杵研磨，直到?jīng)]有肉眼可見的組織塊。
3. 將勻漿液全部轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 的塑料離心管中。
4. 4℃ 12,000g 離心 10 分鐘，組織殘?jiān)槠瑢⑿纬沙恋怼?/p>
5. 將上清液轉(zhuǎn)移至一新的 1.5 mL 塑料離心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要進(jìn)行 SDS-PAGE 電泳，可取部分到離心管中，加入 5×SDS-PAGE 上樣緩沖液使其終濃度為 1×（加入樣品體積的 1/4 即可，40uL 樣品加入 10uL 5×SDS-PAGE 上樣緩沖液），在沸水中水浴 5 分
鐘后立即上樣電泳。
三：液氮研磨法
注意：使用玻璃和陶瓷的研缽
1. 取大約 100 mg 動物或植物組織樣品，轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的研缽中。
2. 加入少量液氮，用研磨杵研磨成粉。
3. 加入 1mL 動植物總蛋白微量提取溶液 A 溶解，然后將溶液全部轉(zhuǎn)移到 1.5 mL的塑料離心管中。
4. 4℃ 12,000 g 離心 10 分鐘，組織殘?jiān)槠瑢⑿纬沙恋怼?/p>
5. 將上清液轉(zhuǎn)移至一新的 1.5 mL 塑料離心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要進(jìn)行 SDS-PAGE 電泳，可取部分到離心管中，加入 5×SDS-PAGE 上樣緩沖液使其終濃度為 1×（加入樣品體積的 1/4 即可，40uL 樣品加入 10uL 5×SDS-PAGE 上樣緩沖液），在沸水中水浴 5 分
鐘后立即上樣電泳。
注意：
1．如果 4℃ 12,000 g 離心 10 分鐘后得到的上清液中還有可見的沉淀，可以將上清轉(zhuǎn)移到一個新的離心管中后再 4℃ 12,000 g 離心 10 分鐘，以去除可見的小碎片。
2．植物組織中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代謝產(chǎn)物，如果需要除去植物蛋白樣品中殘存的色素等雜質(zhì)，可以在最后得到的上清液中加入 5倍體積的冷丙酮或冷甲醇，混勻后-20℃放置 1 小時或過夜，然后 4℃12,000 rpm 離心 10 min，棄上清后室溫風(fēng)干 3-5 分鐘，然后將樣品溶于自備的后續(xù)實(shí)驗(yàn)緩沖液中即可。經(jīng)過此純化處理后，部分蛋白質(zhì)可能會發(fā)生變性，不能再用于活性檢測。
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上海康朗生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專營生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品。總部位于上海，并在北京、廣東，江西，吉林等全國30多個省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學(xué)院，上海中醫(yī)藥大學(xué)，華東師范大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。