中草藥DNAout

產(chǎn)品及特點 

基于 PCR 的中藥分子鑒定方法是辨別中藥真?zhèn)?，保證藥材質(zhì)量，促進(jìn)中藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化的十分重要的手段。但由于日曬，高溫烘烤等處理極大地破壞了中藥材DNA的完整性；處理過程中多酚多糖及其氧化物也會與DNA發(fā)生復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)，所以從中藥材中提取可以用于 PCR 的 DNA 比從新鮮植物中提取要困難很多。為解決這一問題，基因在植物 DNAOUT 產(chǎn)品基礎(chǔ)上開發(fā)了本產(chǎn)品。其特點如下：

1. 適合于大多數(shù)藥材。

2. 得到的 DNA 純凈，OD260/280 一般都在 1.6 以上，原液或 100 倍之內(nèi)的稀釋液一般都能直接作為 PCR 模板。

3. 操作簡單，整個過程只需要三十分鐘左右。

4. 試劑無毒無害，環(huán)保衛(wèi)生。
規(guī)格及成分 成 份 編 號 小編盒包裝 
中草藥 DNAout 溶液 A 60805a 75 mL 中草藥 DNAout 溶液 B 60805b 75 mL 使用手冊 60805sc 1 份

運輸及保存 常溫運輸及保存，有效期一年。

自備試劑 氯仿、異丙醇、75%乙醇 

使用方法 

1. 65℃預(yù)熱溶液 A，待其沉淀溶化后，充分混勻，取 0.75 mL 加入到 10-15mL的塑料離心管中并放置于 65℃待用。

2. 稱取 20 mg 左右的中草藥，先剪成或研磨成微小的碎片，然后轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的溶液 A 中勻漿，勻漿過程中將產(chǎn)生大量泡沫，屬于正?，F(xiàn)象。也可以液氮研磨后將中草藥粉末加入到預(yù)熱的溶液 A 中(建議不要在陶器或玻璃研缽中研磨，因為其主要成分二氧化硅會非特異地吸附 DNA，降低 DNA 回收量。但可以在塑料研缽中研磨)。

3. 將勻漿液置于 65℃水浴保溫 5 分鐘，然后全部轉(zhuǎn)移到新的 1.5mL 塑料離心管中(此時勻漿液較為粘稠，可將槍頭剪去一截后轉(zhuǎn)移上清，植物碎片可倒入)。 

4. 12000-15000 g 室溫離心 3 分鐘，將上清轉(zhuǎn)移到新的 1.5mL 塑料離心管中(上清的體積一般為 200-700 μL，如果體積超過 700 μL，多余部分可以不要)。有的上清液會有少量細(xì)小塊狀物，但對后續(xù)操作沒有影響，不必進(jìn)行特殊處理。 

5. 在上清液中加入等體積的溶液 B，上下顛倒 30 秒充分混勻（溶液將呈白色混濁狀），然后置冰浴中 5 分鐘。 

6. 12000-15000 g 室溫離心 3 分鐘，轉(zhuǎn)移上清到新離心管中。

7. 加入 0.2 mL 的氯仿(自備)，震蕩器上充分振蕩 30 秒混勻。

8. 12000-15000 g 室溫離心 3 分鐘，兩相交界面將有白色膜狀物。小心轉(zhuǎn)移上清到新離心管中。

9. 重復(fù)氯仿抽提步驟一次，此步可以有效去除含色素物質(zhì)。

10. 加入 0.6-1 倍體積的異丙醇(自備)，上下顛倒 30 秒混勻。

11. 12000-15000 g 離心 5 分鐘，棄上清，管底將有微小 DNA 沉淀。

12. 沉淀用 75%乙醇清洗 2 次后，室溫晾干。

13. 加入 50-100 μL 自備緩沖液(如 TE)溶解沉淀。DNA 即可用于電泳，酶切和PCR 等反應(yīng)。如果需要測 OD，則必須乙醇沉淀去除降解的 RNA。注意:用本產(chǎn)品提供的 RNase 處理 DNA 樣品時,做好按《分子克隆手冊》等參考書上的方法徹底去除其中的 DNase。