凝膠法miRNA分離試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn)
microRNA(miRNA)和 RNA 干擾研究是當(dāng)今分子生物學(xué)研究的一大熱點(diǎn),但快速分離和純化相關(guān)的小 RNA 十分棘手,是目前研究 miRNA 的主要技術(shù)障礙之一。它具有下列特點(diǎn):
1. 從總 RNA 中直接分離純化小 RNA,不需要使用離心吸附柱。得到的小RNA 長(zhǎng)度大部分在 200 nt 以下,包括 5S RNA、tRNA、 miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA 和 snRNA 等。
2. 操作簡(jiǎn)單快速,整個(gè)過程只需要約 30 分鐘。
3. 小 RNA 純凈,OD260/280 一般都在 1.9 以上。
4. 可用于 RT-PCR、miRNA 標(biāo)記、microarray 等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
5. 此方法能去除 90%左右的大 RNA,但會(huì)有少量殘留大 RNA,如果需要純度更高,可以選擇 PAGE 回收法。
運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸.4℃保存,有效期一年。
自備試劑 RNase-free 塑料離心管。
使用方法 1. 在純化好的 100 uL 總 RNA(含大 RNA 和小 RNA)中,加入 50 uL溶液 A,振蕩 30 秒混勻。如果 RNA 樣品體積不足 100 uL,可以用RNase-free 水補(bǔ)足,如果體積超過 100 uL,可以用本公司核酸濃縮劑濃縮到 100 uL。
2. 室溫 12000-15000 g 離心 30 分鐘。小 RNA 在上清中,大 RNA 在沉淀中。注意:離心時(shí)間不能短于 30 分鐘,否則大 RNA 沉淀不充分。
3. 小心將上清液轉(zhuǎn)移到干凈的 1.5 mL RNase-free 塑料離心管中。留下的沉淀可以用 75%乙醇洗滌后做大 RNA 電泳對(duì)照用。
4. 在上清液中加入 200 uL 溶液 B,振蕩 30 秒混
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