紅細胞裂解液B型(流式細胞分析用)
產(chǎn)品及特點 本產(chǎn)品用于快速裂解哺乳動物全血中的紅細胞而基本不破壞白細胞和其 他淋巴細胞的完整性和生物學活性。由于紅細胞是血液的主要細胞成份,不 含 DNA 和 RNA,其所含血紅素能抑制 PCR 反應,所以先用本產(chǎn)品裂解紅細 胞,再提取基因組 DNA 或 RNA 有助于提高所得樣品純度。
1. 可以處理人全血、小鼠全血、脾細胞中的紅細胞。
2. 高效,一次處理能裂解 80%以上的哺乳動物紅細胞,能回收 90%左右的 白細胞。一般樣品最多只需要處理兩次。
3. 擴容性好, 可以一次處理多達幾十毫升的樣品,也可以處理 100 uL 的 血液。
4. 基于 NH4Cl 裂解法,得到的白細胞主要用于流式細胞分析。
5. 本產(chǎn)品只能用于科研,不能用于臨床。
規(guī)格及成分 成 份 編 號 大立盒包裝
紅細胞裂解液 B 型 LM90309 250 mL 使用手冊 LM90309sc 1 份
運輸及保存 常溫運輸,4℃保存,有效期一年。
自備試劑 去離子水
使用方法 用去離子水將本產(chǎn)品(10×)稀釋為 1×工作液(1 mL 本產(chǎn)品加 9 mL 去離子水),待溫度回到室溫或 37℃加熱到 37℃的時候再使用。工作液不能 長期放置,只能現(xiàn)配現(xiàn)用。
一.裂解哺乳動物全血中的紅細胞 1. 離心哺乳動物抗凝血液后棄血漿部分,按每 1 mL 哺乳動物抗凝血液細 胞沉淀加 10 mL 1×工作液的比例加入紅細胞裂解液 B 型的 1×工作 液。
2. 輕柔吹打充分混勻。
3. 室溫放置 15 分鐘(注意:放置時間不要超過 15 分鐘)。
4. 4℃1000 rpm 離心 10 分鐘,吸棄紅色的上清液。
5. 如果紅細胞裂解不完全,可以重復第 1-4 步。 6. 用適當?shù)淖詡渚彌_液(如 Hanks 溶液)重懸白細胞沉淀。 7. 用于細胞計數(shù)和流式細胞分析等后續(xù)試驗。 二.裂解組織細胞中的紅細胞 1. 按標準方法用自備的胰酶將組織消化成單個細胞懸液,離心棄上清。 2. 按 1:10 的比例向細胞沉淀中加入紅細胞裂解液 B 型工作液,輕柔吹打 均勻。 3. 室溫放置 15 分鐘(注意:放置時間不要超過 15 分鐘)。 4. 4℃ 1000 rpm 離心 10 分鐘,吸棄紅色的上清液。 5. 如果紅細胞裂解不完全,可以重復第 2-4 步。
6. 用適當?shù)淖詡渚彌_液(如 Hanks 溶液)重懸白細胞沉淀。
7. 用于細胞計數(shù)和流式細胞分析等后續(xù)試驗。
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