cDNA第二鏈合成試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn)cDNA 第二鏈合成的原理是用 RNase H 使 RNA-DNA 雜合鏈中的 RNA 產(chǎn)生切口，再用 DNA Polymerase I 通過切口平移(nick translation)反應(yīng)進(jìn)行RNA 鏈取代合成 cDNA 第二鏈，其示意圖如下:
本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，含有合成 cDNA 第二鏈的所有試劑（包括 RNase H、E.coli DNA聚合酶 1 和 DNA ligase。
2. 一管式操作，不需要每次進(jìn)行純化，不丟失寶貴德樣品。
3. 所得雙鏈 cDNA 可以直接用于后續(xù)的常規(guī) PCR、real-time PCR、cDNA 文庫構(gòu)建、抑制性差減雜交等。
4. 本試劑盒足夠 30 次 80uL 體系的 cDNA 第二連合成反應(yīng)。
cDNA第二鏈合成試劑盒
規(guī)格及成分 成分 編號(hào) 十孔盒包裝
5×cDNA 第二鏈合成緩沖液 131005a 250 μL
20×cDNA 第二鏈合成酶混合液 131005b 60 μL
0.5 M EDTA 溶液 130309 60 μL
超純水 100935 1 mL
使用手冊 131005sc 1 份
cDNA第二鏈合成試劑盒運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。
自備試劑 cDNA 鏈合成試劑等
使用方法 一、合成 cDNA 條鏈
本試劑盒不提供 cDNA 鏈合成試劑，用戶需自備相關(guān)試劑合成 cDNA鏈。
二、合成 cDNA 第二鏈
1. 在冰浴上向 5uL 已經(jīng)完成 cDNA 條鏈合成的反應(yīng)體系（逆轉(zhuǎn)錄體系）中依次加入下表試劑，如果多于 5uL，請只取用 5uL：
成分 用量
超純水 25 μL
cDNA 第二鏈合成緩沖液 8 μL
cDNA 第二鏈合成酶混合液 2 μL
共 40uL，輕柔吹打混勻后，短暫離心，16℃保溫 2 小時(shí)
自備的 T4 DNA 聚合酶（見注） 1 μL
輕柔吹打混勻后，16℃繼續(xù)保溫 30 分鐘
0.2M EDTA 溶液 2 μL
注：克隆雙鏈 cDNA 一般需要平末端化，需要此步處理。PCR、SSH 等后續(xù)處
理一般不需要把雙鏈 cDNA 平末端化，則可以跳過 T4 DNA 聚合酶處理步驟，
直接用 EDTA 終止反應(yīng)。
2. 電泳 5 μL 檢測 cDNA 質(zhì)量。如果 cDNA 在 0.5-10Kb 的范圍內(nèi)呈模糊一片，則 cDNA 合格。如果沒看見 cDNA 或有其他異常，需查找原因后再繼續(xù)。
3. 所得 cDNA 可以直接用于后續(xù)的常規(guī) PCR、real-time PCR、cDNA 文庫構(gòu)建、抑制性差減雜交（SSH）等實(shí)驗(yàn)。
關(guān)鍵字： cDNA第二鏈合成試劑盒廠家；cDNA第二鏈合成試劑盒現(xiàn)貨
上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專營生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品。總部位于上海，并在北京、廣東，江西，吉林等全國30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學(xué)院，上海中醫(yī)藥大學(xué)，華東師范大學(xué)，第二軍醫(yī)大學(xué)，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。