柱式DNA膠回收試劑盒(又名柱式DNAback)
產(chǎn)品及特點 本試劑盒用于從瓊脂糖凝膠中或DNA反應體系中(如PCR反應)回收DNA片段。試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合DNA的硅膠膜和獨特的溶膠體系,可以從瓊脂糖凝膠中或DNA反應體系中高效快速回收DNA片段,回收效率可達50-90%(跟片段大小相關(guān))。本產(chǎn)品的特點如下:
1. 高效,回收效率最高可達90%(跟片段大小和膠濃度等因素有關(guān)),可以跟跟國外著名廠家的產(chǎn)品媲美。
2. 快速,整個過程只需要十余分鐘。洗脫液不需要額外加乙醇。
3. 兩用,既可用于膠回收,也可以用于PCR或其他酶反應回收。
4. 范圍廣,回收DNA的長度范圍為50 bp-40 Kb(但效率各不相同)。
5. 能回收單鏈、雙鏈及環(huán)狀DNA,吸附量為10ug。
6. 回收的DNA可直接用于酶切、連接、PCR、測序等多種分子生物學實驗。
7. 本試劑盒足夠純化50片含DNA的瓊脂糖凝膠條(每片膠條重量不超過250mg),可以純化50次酶反應(包括PCR反應,每次體積不超過250uL)。
柱式DNA膠回收試劑盒(又名柱式DNAback)
規(guī)格及成分 成 份 編 號 大紙盒包裝
通用溶膠液 60409 25 mL
吸附柱活化液 170602 25 mL
通用洗柱液 60408 50 mL
離心吸附柱(窄口) 60911 50 套
DNA 洗脫液 3.0 170603 10 mL
使用手冊 60202sc 1 份
柱式DNA膠回收試劑盒(又名柱式DNAback)運輸及保存 常溫運輸及保存,有效期為一年。由于通用溶膠液 2.0 是高鹽溶液,因此在低溫時容易產(chǎn)生沉淀。如果產(chǎn)生沉淀,需要 60℃加熱溶解后才可以使用。
自備試劑 異丙醇
使用方法 一:對膠回收:
1. 用干凈的刀片切取含 DNA 片段的瓊脂糖凝膠(100 mg 左右,盡可能多地把多余的膠切除,否則會影響回收效率),放入一干凈的 1.5 mL 塑料離心管(自備)中稱重,按重量比為 1:2 的比例加入通用溶膠液 2.0 (0.1 g 的瓊脂糖凝膠需要加入 0.2mL 的通用溶膠液 2.0)。如果瓊脂糖凝膠的濃度大于 2%,則需要按 1:3 的比例加入通用溶膠液 2.0 溶解膠塊。
2. 50℃保溫 10 分鐘使膠完全溶化,每隔 2-3 分鐘振蕩數(shù)次以促進瓊脂糖凝膠的溶化。如果片段長度在 300bp 以下,建議不要 50℃保溫,而是延長溶膠時間,以免 DNA 變性,影響回收率。
3. 在等待期間,活化離心吸附柱。在離心吸附柱中加入 0.5mL 吸附柱活化液,套上收集管后室溫放置 2 分鐘,然后 12,000 rpm 離心 2 分鐘,倒棄穿透液,再將吸附柱套上收集管后待用?;罨蟮碾x心吸附柱必須在當天使用。
4. 在上柱前,在溶化的膠中加入相當于膠塊體積 1/2 的異丙醇(對 100mg膠塊,加 50uL),快速振蕩 10 秒混勻。
5. 將溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,套上收集管,靜置 3 分鐘。注意:靜置有助于 DNA 與離心吸附柱的硅膠膜結(jié)合。本產(chǎn)品提供的離心吸附柱的上樣體積為 0.8mL,若溶膠液的總體積大于 0.8mL,一次加不完,可以分多次將溶液加入到吸附柱中。
6. 12000-15000 g 離心 1 分鐘,倒掉收集管中的穿透液。
7. 加入 0.7mL 通用洗柱液于離心柱中,12000-15000 g 離心 1 分鐘,倒棄收集管中的廢液。如果回收的 DNA 用于鹽敏感實驗(如平末端連接或直接測序),建議加入通用洗柱液后靜置 2-5 分鐘再離心。
8. 12000-15000 g 離心半分鐘以去除離心柱中的殘留液體。
9. 將離心柱吸附置于一新的干凈的塑料離心管(自備)中,懸空加入 50 uLDNA 洗脫液于離心吸附柱硅膠膜的中央。注意:如果回收的 DNA 用于測序,則可用重蒸水(自備)洗脫 DNA。DNA 洗脫液可以也用 TE 替代,但用水或 TE 替代 DNA 洗脫液 3.0 時,回收率可能稍有降低。
10. 靜置 3 分鐘后 12000-15000 g 離心 1 分鐘。
11. 離心管底部所得溶液即為純化的 DNA 溶液,可立即用于后續(xù)實驗或者放-20℃長期保存。如果將所得 DNA 溶液再次加回到離心吸附柱中,重復洗脫過程,將得到更多的 DNA。
12. 用電泳方法或測 OD 方法確定回收所得 DNA 的濃度,1 OD260 對應的濃度是 50ug/mL(對雙鏈 DNA)或 40ug/mL(對單鏈 DNA),純凈 DNA的 OD260/OD280 比值應該在 1.8 左右。注意:OD 讀數(shù)跟 pH 相關(guān),如果用自備的重蒸水洗脫,OD 值會低于在 DNA 洗脫液 3.0 中測定的數(shù)字。
二:PCR 或其他酶反應回收
13. 直接在 PCR 或其他酶反應管中加 2 倍體積的通用溶膠液,振蕩 10 秒混勻。如果 PCR 反應中使用了石蠟,需要預先去除。
14. 活化離心吸附柱。在離心吸附柱中加入 0.5mL 吸附柱活化液,套上收集管后室溫放置 2 分鐘,然后 12,000 rpm 離心 2 分鐘,倒棄穿透液,再將吸附柱套上收集管后待用?;罨蟮碾x心吸附柱必須在當天使用。
15. 在上柱前,在反應液和溶膠液的混合液中加入相當于反應體積 1/2 的異丙醇(對 100uL 的反應液,加 50uL),快速振蕩 10 秒混勻。
16. 直接進入上面膠回收操作的第 5 步并進行后面的操作。
關(guān)鍵字: 柱式DNA膠回收試劑盒(又名柱式DNAback)廠家;柱式DNA膠回收試劑盒(又名柱式DNAback)現(xiàn)貨
上??道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務于一體的一家生物科技企業(yè),專營生化試劑、標準品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細胞生物學,分子生物學等高生物產(chǎn)品??偛课挥谏虾?,并在北京、廣東,江西,吉林等全國30多個省市設有分公司和代理機構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學院、清華、北大、復旦,上海交大,復旦醫(yī)學院,上海中醫(yī)藥大學,華東師范大學,第二軍醫(yī)大學,曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務確。