柱式血液RNAout
產(chǎn)品及特點(diǎn)本產(chǎn)品經(jīng)過基因精心優(yōu)化而得,多項(xiàng)指標(biāo)超過國內(nèi)外同類產(chǎn)品。本產(chǎn)品是基因在血液 RNAOUT(CAT#:3071)基礎(chǔ)上開發(fā)的柱式升級(jí)產(chǎn)品,
專門從動(dòng)物全血樣品中快速提取總 RNA。跟血液 RNAOUT 相比,本產(chǎn)品具有
下列特點(diǎn):
1. 比血液 RNAout 更加簡單快捷,直接使用新鮮的或冷凍的抗凝全血樣品,不需裂解紅細(xì)胞等任何預(yù)處理步驟,整個(gè)提取過程只需要十分鐘左右,可以全在室溫下進(jìn)行。
2. 產(chǎn)量和純度更高,OD260/280 均在 2.0 左右,產(chǎn)率一般為 2-5 ug/mL人血。
3. 每次微量提取的樣品處理量可以達(dá)到 1.5 mL,高于進(jìn)口的同類產(chǎn)品。
4. 與常用的抗凝劑(包括肝素,EDTA,檸檬酸鈉,草酸鈉)兼容,得到的RNA 可以直接用于 RT-PCR 和 Northern 雜交等研究。
柱式血液RNAout
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 大紙盒包裝
柱式血液 RNAout 溶液 A 71202a 50 mL
柱式血液 RNAout 溶液 B 71202b 15 mL(棕色瓶)
柱式血液 RNAout 溶液 C 71202c 50 mL 離心吸附柱 60911 50 套
通用洗柱液 60408 50 mL RNA 洗脫液 71207 10 mL
使用手冊(cè) 71202sc 1 份
柱式血液RNAout運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存,有效期一年。自備試劑 氯仿。
使用方法
1. 將 0.2-1.5 mL 新鮮或解凍后的抗凝全血加入到 1.5 mL 塑料離心管中。
2. 12000-15000 g 室溫離心 3 分鐘,棄上清(血漿)。如果此時(shí)血液細(xì)胞沉淀體積大于 0.2 mL, 則需要減少血液的使用量,具體減少量需根據(jù)具體情況決定,因?yàn)楦鱾€(gè)個(gè)體(尤其是患者)血液中白細(xì)胞數(shù)目差別很大。
3. 將 1 mL 溶液 A 加入到血液細(xì)胞沉淀中,用移液槍充分吹打沉淀使細(xì)胞裂解。
4. 將 0.3 mL 的溶液 B 加入到離心管中,劇烈震蕩 30 秒。
5. 和 0.2 mL 氯仿加入到離心管中,劇烈震蕩 30 秒。
6. 12000-15000 g 室溫離心 3-5 分鐘,將上清液(為無色或淺紅色,約0.5-0.9 mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈離心管中。注意:轉(zhuǎn)移的液體不要超過 0.7mL,否則下一步不能加入等體積的溶液 C。為防止污染,留 100 uL左右的上清液。下層有機(jī)相一般呈深紅色,中間層為白色,含有 DNA,蛋白質(zhì)和其他細(xì)胞破碎物,避免觸及或吸取。
7. 加入等體積的溶液 C,充分顛倒混勻。
8. 分兩次將溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,每次轉(zhuǎn)移后 12000-15000 g 室溫離心半分鐘,棄穿透液。
9. 加 0.7 mL 通用洗柱液,室溫離心半分鐘,棄穿透液。
10. 如果有必要,可以再加 0.3 mL 通用洗柱液,室溫離心半分鐘,棄穿透液。注意:增加此步可以進(jìn)一步提高 RNA 的純度。
11. 室溫 12000-15000 g 離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的通用洗柱液會(huì)影響 RNA 的后續(xù)反應(yīng)。
12. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到一個(gè)自備的 RNase-free 的收集管中,加入 50-100uL RNA 洗脫液,室溫放置 1-2 分鐘。
13. 12000-15000 g 室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為 RNA 樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA 完整性的電泳檢測(cè):如果需要做 Northern 雜交,強(qiáng)烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行 RNA 電泳,因?yàn)榉亲冃阅z不能分離所有的 RNA 分子(BioTechniques,28:414,2000)。
15. RNA 產(chǎn)量產(chǎn)率測(cè)定:將 5-10 μL RNA 溶于 TE 緩沖液中(pH7.5-8.2 之間)檢測(cè)其在 OD260 的光吸收。通過光吸收可以得出 RNA 濃度(1OD260 的 RNA=40 μg/mL),進(jìn)而計(jì)算出 RNA 的產(chǎn)量(濃度 X 體積)和產(chǎn)率(RNA 產(chǎn)量/組織用量)。人血 RNA 產(chǎn)率一般為 2-5 ug/mL。
16. RNA純度測(cè)定:無污染的總RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān)),高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染,但一般不影響 RT-PCR 等反應(yīng)
關(guān)鍵字: 柱式血液RNAout廠家;柱式血液RNAout現(xiàn)貨
上??道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè),專營生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué),分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品??偛课挥谏虾?,并在北京、廣東,江西,吉林等全國30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦,上海交大,復(fù)旦醫(yī)學(xué)院,上海中醫(yī)藥大學(xué),華東師范大學(xué),第二軍醫(yī)大學(xué),曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。