改良Masson 三色染色液說明書

貨號：RS1350

規(guī)格：8×50mL/8×100mL

有效期：12個月有效

產(chǎn)品組成：

產(chǎn)品簡介：

結(jié)締組織狹義上是指其含有的三種纖維：膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維、而膠原纖維（collagen  fiber）是分布最廣、含量最多的一種纖維。Masson三色染色又稱馬松染色，是結(jié)締組織染色中最經(jīng)典的一種方法，是膠原纖維染色權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)：分子的大小由分子量來體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織，而大分子量則只能進入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而，淡綠或苯胺藍(lán)的分子量很大，因此Masson染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色或藍(lán)色，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

改良Masson三色染色與常規(guī)Masson三色染色的區(qū)別在于采用天青石藍(lán)蘇木素淡染細(xì)胞核。其特點在于：分化時間短(1～2分鐘)；色彩清晰鮮艷；適用范圍廣，適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色；所染切片保存時間長且不易褪色。改良Masson染色膠原纖維呈藍(lán)色，肌纖維、胞質(zhì)、纖維素、角蛋白和紅細(xì)胞呈紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)褐色，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

自備材料： 

10%的福爾馬林、蒸餾水、系列乙醇、二甲苯、染缸

操作步驟（僅供參考）：

1. 組織固定于10%的福爾馬林中，常規(guī)脫水包埋。
2. 切片厚4μm，常規(guī)脫蠟至水。 
3. 切片入Bouin液，于室溫作用一晚或置入37℃的溫箱內(nèi)2h進行媒染，然后流水沖洗至切片上的黃色消失。 
4. 天青石藍(lán)染色液滴染2~3min。 稍水洗。 
5. Mayer蘇木素染色液滴染2~3min。  稍水洗。 
6. 酸性分化液分化數(shù)秒。 流水沖洗10min。 
7. 麗春紅品紅染色液滴染10min。 蒸餾水稍沖洗。 
8. 磷鉬酸溶液處理約10min。 
9. 傾去上液，切片不用水洗，直接滴入苯胺藍(lán)染色液染5min。 
10. 弱酸溶液處理2min。 
11. 95%的乙醇快速脫水。 無水乙醇脫水3次，每次5~10s。 
12. 二甲苯透明3次，每次1~2min。  中性樹膠封固。

染色結(jié)果：

注意事項：

1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。
2.  酸性分化液的分化時間應(yīng)該依據(jù)切片薄厚，組織的類別和新舊而定。
3.  磷鉬酸溶液的作用一方面是使染上紅色的膠原纖維被分化成無色或淡紅色，而肌纖維纖維素等仍呈鮮紅色；另一方面對膠原纖維又起媒染作用。使膠原纖維與大分子染料的苯胺藍(lán)液較易結(jié)合。
4. 苯胺藍(lán)液染色后用弱酸溶液處理，目的是除去原漿內(nèi)的藍(lán)色，是染色鮮艷和清晰。如Zenker液固定的組織，弱酸溶液處理可延長至5min。 
5. 弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷，如使用量大可自行配置0.1-0.3%乙酸溶液予以替代。

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。