染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)
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染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)是在體內(nèi)環(huán)境中研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方法,廣泛應(yīng)用于組蛋白修飾、特定轉(zhuǎn)錄因子的基因調(diào)控作用等相關(guān)領(lǐng)域。隨著新一代測序技術(shù)的發(fā)展和成熟,染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)與高通量測序的整合——Chromatin Immunoprecipitation Sequencing (ChIP Sequencing ),可在全基因組范圍對蛋白結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行高效而準(zhǔn)確的篩選與鑒定,同時(shí)也為研究的深入開展打下基礎(chǔ)。
?? ? ? 采用特異性抗體對目的蛋白進(jìn)行免疫沉淀后,分離與其結(jié)合的基因組DNA片段,再通過高通量測序與數(shù)據(jù)分析,在全基因組范圍內(nèi)尋找目的蛋白的DNA結(jié)合位點(diǎn),并且可以基于多個(gè)樣品進(jìn)行差異比較。
技術(shù)優(yōu)勢: - 檢測范圍廣:全基因組范圍的免疫沉淀與測序分析;
- 高性價(jià)比:基于抗體富集目標(biāo)區(qū)域,有效降低測序數(shù)據(jù)量;
- 微量樣本:只需10 ng以上免疫沉淀后的DNA,即可進(jìn)行測序分析。
研究內(nèi)容:一、標(biāo)準(zhǔn)信息分析?
1)???????? 去接頭污染,去低質(zhì)量reads和產(chǎn)量情況統(tǒng)計(jì);
2)???????? ChIP 測序序列與參考基因組序列的比對;
3)???????? ChIP 測序Reads 在全基因組的分布;
4)???????? 統(tǒng)計(jì)ChIP測序數(shù)據(jù)富集區(qū)域( Peak ) 的信息;
5)???????? Peak相關(guān)基因篩選與GO功能聚類分析;
6)???????? 多個(gè)樣品的差異分析;
7)???????? UCSC Genome Browser使用說明;
二、高級信息分析?不同表達(dá)水平的基因在TSS附近區(qū)域的reads 富集程度。
三、定制化信息分析可結(jié)合客戶的需求,協(xié)商確定定制化信息分析內(nèi)容。?
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