名稱 Soil Protein Extraction Kit / 土壤蛋白提取試劑盒
規(guī)格 50T | 100T
存儲(chǔ) 蛋白酶抑制劑-20℃保存；蛋白提取液室溫保存。有效期：一年。

試劑組分 
Component 50 assay 100 assay
Reagent A: Soil Protein Extract（土壤蛋白提取液） 50ml 100ml
Reagent B: Protease Inhibitor Cocktail（蛋白酶抑制劑混合物） 100ul 200ul

土壤蛋白提取液： 含多種有效成分，可以充分釋放各類水溶性和脂溶性蛋白，又可結(jié)合釋出的蛋白防止沉淀。
蛋白酶抑制劑混合物：包含7種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑，AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、PepstatinA、Bestatin、E-64、EDTA。


【注意】

1、蛋白酶抑制劑混合物避免反復(fù)凍融。
2、如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

產(chǎn)品簡介 

Phygene土壤蛋白提取試劑盒適用于從各種紅壤、棕壤、褐土、黑土、栗鈣土、漠土、鹽堿土、巖性土和高山土等中提取土壤中總蛋白。提取過程簡單方便，可在1 小時(shí)內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。

本試劑盒提取的蛋白不可用于2D電泳。如下游實(shí)驗(yàn)需要用于2D電泳，請使用Phygene相對應(yīng)的試劑盒。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1、使用方便，將蛋白提取的時(shí)間縮短至 30 分鐘-1 小時(shí)。
2、含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
3、紫外檢測蛋白濃度時(shí)，背景干擾低。
4、蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含7種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

試劑盒以外自備試劑和儀器：
1)移液器、吸頭
2)離心機(jī)及離心管
3)渦旋振蕩器 
4)冰箱，冰盒


使用參考 

使用前注意事項(xiàng)：

a. 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。
b. 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。
c. 蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
d. 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。


1. 提取液制備：每 1ml 冷的蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 土壤經(jīng)干燥過篩，除去植物根系等雜質(zhì)，置于研缽中研磨成細(xì)小均勻顆粒。
3. 每 0.5g 研磨后的土壤[1]中加入1ml 冷的土壤蛋白提取液（提取液體積約土壤體積的3 倍左右），置于渦旋混合儀上振蕩1 分鐘, 使其充分混合均勻，混勻后，于搖床中在4℃條件下振蕩15-20 分鐘。
4. 在 4℃，14000rpm 條件下離心15 分鐘。
5. 快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即可得到土壤總蛋白。
6. 將上述蛋白提取物定量[2]后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)[3]。

【注釋】
[1] 土壤數(shù)量根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況調(diào)整，每次的裂解液用量并不是一定的，請根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整。
[2] 建議用 BCA 法進(jìn)行蛋白定量。
[3] 蛋白樣品－80℃存放一年沒有問題。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被細(xì)菌污染。

注意事項(xiàng) 

1. 本試劑盒僅供科學(xué)研究使用。
2. 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。
3. 蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
4. 使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
5. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。