Phygene 的 MTS 細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒是應(yīng)用新型的水溶性甲臢化合物[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁),內(nèi)鹽;MTS] 快速高靈敏度檢測細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的比色檢測產(chǎn)品。
MTS 被細(xì)胞生物還原成一種可溶于組織培養(yǎng)基的甲臢化合物,新陳代謝活躍的活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶類將 MTS 轉(zhuǎn)化成液態(tài)可溶的甲臢化合物,這種甲臢化合物在 490nm 的吸收值可以直接在 96 孔板上測量,而不需要另外作處理。由 490nm 測量的吸收值所表示的甲臢產(chǎn)物的數(shù)量與培養(yǎng)物中活性細(xì)胞的數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)量呈線性關(guān)系。
MTS 溶液可以直接加入到細(xì)胞樣品中,不需要預(yù)配各種成分,MTS 溶液很穩(wěn)定,對細(xì)胞沒有毒性,可以長時間孵育細(xì)胞。
MTS 法測定細(xì)胞增殖或毒性試驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的靈敏度高,無放射性,檢測細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)的靈敏度比其它方法如 MTT, XTT和 WST-1 高。
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產(chǎn)品特點(diǎn)
?8?9 易于使用:直接將 MTS 溶液,加入到細(xì)胞中,孵育然后讀取吸光度值。
?8?9 快速: :在 96 孔板中進(jìn)行檢測,不需洗滌或收獲細(xì)胞。也不需要溶解步驟。因?yàn)?MTS 甲臢產(chǎn)物可溶解在組織培養(yǎng)基中。
?8?9 非放射性:不需液閃混合液,不需處理放射性廢物(不像[3H]-胸腺嘧啶)。
?8?9 靈活:平板被讀數(shù)后還可以放回溫箱繼續(xù)顏色反應(yīng)(不像 MTT)。
?8?9 安全:不需要揮發(fā)性有機(jī)溶劑來溶解甲臢化合物(不像 MTT)。
產(chǎn)品應(yīng)用
細(xì)胞增殖;細(xì)胞毒性;凋亡結(jié)果
化學(xué)靈敏性
細(xì)胞貼附確定;趨化性
注意事項(xiàng)
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。