名稱 EDTA抗原修復(fù)液（50×）| EDTA Antigen Retrieval Solution（pH8.0）
規(guī)格 100ml | 500ml
*一個(gè)包裝的本產(chǎn)品可以配制成5000毫升抗原修復(fù)液(1X)。按照每個(gè)片子需要10毫升抗原修復(fù)液(1X)計(jì)算，一個(gè)包裝的本產(chǎn)品可以用于500個(gè)樣品。
存儲 常溫運(yùn)輸，長期保存放置冷藏！
產(chǎn)品簡介
EDTA抗原修復(fù)液(EDTA Antigen Retrieval Solution)是一種常用的抗原修復(fù)液，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。
細(xì)胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link)，從而遮蔽樣品的抗原位點(diǎn)，導(dǎo)致免疫染色時(shí)染色信號減弱，甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果。
本抗原修復(fù)液采用了廣泛使用的EDTA，可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。
通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理，而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理?？乖迯?fù)會大大改善石蠟切片的免疫染色效果，但對于冰凍切片的染色效果很多文獻(xiàn)資料表明也有顯著改善。特別是當(dāng)冰凍切片免疫染色效果欠佳時(shí)，可以考慮嘗試進(jìn)行抗原修復(fù)。從原理上來看，無論冰凍切片還是細(xì)胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品，進(jìn)行抗原修復(fù)都會有效去除蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。
本產(chǎn)品特別適合用于石蠟切片，也可以用于冰凍切片等其它樣品。
本產(chǎn)品是 50×的濃縮液，使用之前按需要量用去離子水或雙蒸水稀釋至 1×。
使用說明
1. 對于石蠟切片：
a. 脫蠟：切片在二甲苯中脫蠟5分鐘，再換用新鮮的二甲苯脫蠟，共用二甲苯脫蠟3次。無水乙醇5分鐘，兩次。90%乙醇5分鐘，兩次，70%乙醇5分鐘，一次。蒸餾水5分鐘，兩次。
b.抗原修復(fù)：將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1X)中，95-100℃加熱約15分鐘(加熱時(shí)間可以控制在10-20分鐘內(nèi)，的加熱時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1X)使用前需預(yù)熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避
免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在20-30分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次，每次3-5分鐘。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
2. 對于冰凍切片：
用免疫染色洗滌液洗滌切片5分鐘。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1X)中，95-100℃加熱約15分鐘(加熱時(shí)間可以控制在10-20分鐘內(nèi)，的加熱時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)?？乖迯?fù)液(1X)使用前需預(yù)熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在20-30分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次，每次3-5分鐘。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
3. 對于其它樣品的抗原修復(fù)，可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進(jìn)行。
注意事項(xiàng)
1）本抗原修復(fù)液使用前必須用重蒸水或MilliQ水稀釋50倍，配制成抗原修復(fù)液(1X)。
2）為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
Formalin or other aldehyde fixation forms protein cross-links that mask the antigenic sites in tissue specimens, thereby giving weak or false negative staining for immunohistochemical detection of certain proteins. The EDTA based solution is designed to break the protein cross-links, therefore unmask the antigens and epitopes in formalin-fixed and paraffin embedded tissue sections, thus enhancing staining intensity of antibodies.
This buffer works excellent for many antibodies, but it often gives high background staining (maybe due to endogenous biotin revealed after this pretreatment). So primary antibody can often be highly diluted. It is very useful for low affinity antibodies or when tissue antigens are not intense.