名稱 胰蛋白酶1:250 / Trypsin 1:250 (Porcine Pancreas) 250.N.F.U/mg
規(guī)格 5g | 25g | 100g | 500g
CAS號:9002-07-7
級別:Biotech Grade
溶解性:Very soluble in H2O
Protein:90-100%
Activity:250U/mg
性狀:白色或類白色粉末
保存條件:2~8℃保存,3年。
安全防護:會造成皮膚過敏,可能引起呼吸道刺激
胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 為蛋白酶的一種,EC 3.4.4.4,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中,作為消化酶而起作用。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成后,作為胰液的成分而分泌,受腸激酶,或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內(nèi)切酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷。它不僅起消化酶的作用,而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體,起活化作用。是特異性最強的蛋白酶,在決定蛋白質(zhì)的氨基酸排列中,它成為不可缺少的工具。
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān),在 pH 為 8.0 、溫度為 37℃ 時,胰酶溶液的作用能力最強。使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白質(zhì)可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應(yīng)選用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ,如: D-Hanks 液。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細(xì)胞的作用。
1. 稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為 0.25 %,用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調(diào) PH 到 7.2 左右)或 PBS ( D-hanks )液中。攪拌混勻,置于 4℃ 內(nèi)過夜。
2. 用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺內(nèi)用注射濾器( 0.22 微米微孔濾膜)抽濾除菌。
3. 分裝成小瓶于 -20℃ 保存以備使用可!
Trypsin is available in high quantity in pancreases, and can be purified rather easily. Hence, it has been used widely in various biotechnological processes.
In a tissue culture lab, trypsin is used to resuspend cells adherent to the cell culture dish wall during the process of harvesting cells. Some cell types adhere to the sides and bottom of a dish when cultivated in vitro. Trypsin is used to cleave proteins holding the cultured cells to the dish, so that the cells can be removed from the plates.
Trypsin is commonly used in biological research during proteomics experiments to digest proteins into peptides for mass spectrometry analysis, e.g. in-gel digestion. Trypsin is particularly suited for this, since it has a very well defined specificity, as it hydrolyzes only the peptide bonds in which the carbonyl group is contributed either by an arginine or lysine residue.
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關(guān)鍵字: 胰蛋白酶1:250
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