Caspase-8也稱FLICE、MACH或Mch5，通常以酶原的形式存在，凋亡時激活，被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡轉(zhuǎn)導(dǎo)過程的上游caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介導(dǎo)的凋亡過程中caspase-8被激活形成二聚體，進(jìn)而激活下游caspase-4、6、9、10。
細(xì)胞凋亡屬于程序化細(xì)胞死亡，可見于各種器官和細(xì)胞，在正常發(fā)育、生理、病理過程中對細(xì)胞和器官的穩(wěn)態(tài)具有十分重要的調(diào)節(jié)作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細(xì)胞凋亡過程的蛋白酶家族，包含10多個成員。Caspase-8也稱FLICE、MACH或Mch5，通常以酶原的形式存在，凋亡時激活，被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡轉(zhuǎn)導(dǎo)過程的上游caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介導(dǎo)的凋亡過程中caspase-8被激活形成二聚體，進(jìn)而激活下游caspase-4、6、9、10。試劑盒測定原理基于Caspase-8特異水解其多肽底物Ac-IETD-pNA (N-acetyl-Ile-Glu-Thr-Asp-p-nitroanilide)，釋放出游離的硝基苯胺pNA，后者呈黃色在405 nm具有吸收峰，用可見光分光光度比色方法測定。其吸光度值對應(yīng)于Caspase-8的水解活性。反應(yīng)體系100微升，試劑盒提供的試劑，除標(biāo)準(zhǔn)曲線外可進(jìn)行50或100次樣品測定。

適用：測定哺乳動物組織、細(xì)胞caspase-8活性。

組成與儲存：
1. 裂解緩沖液： 20 ml ，4 oC
2. 反應(yīng)緩沖液： 10 ml ，4 oC
3. 2 mM Ac-IETD-pNA底物： 0.5 ml，－20 oC避光
4. 10 mM pNA標(biāo)準(zhǔn)品： 0.5 ml，－20 oC避光
以上標(biāo)出的量為100次檢測，50次檢測的試劑量減半。試劑常溫運輸。到達(dá)后按要求儲存，1年內(nèi)穩(wěn)定。

所需儀器：
酶標(biāo)儀與96孔酶標(biāo)板；或可見光分光光度計配100μl容積的石英比色杯。
工作波長：吸收波長405 nm，如不具備也可在400~450 nm范圍內(nèi)測定。