細(xì)胞凋亡屬于程序化細(xì)胞死亡，可見(jiàn)于各種器官和細(xì)胞，在正常發(fā)育、生理、病理過(guò)程中對(duì)細(xì)胞和器官的穩(wěn)態(tài)具有十分重要的調(diào)節(jié)作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細(xì)胞凋亡過(guò)程的蛋白酶家族，包含10多個(gè)成員。Caspase-5分子量47.7kD，與ICE有51%的同源性，在過(guò)量表達(dá)時(shí)可誘導(dǎo)凋亡發(fā)生。試劑盒測(cè)定原理基于Caspase-5特異水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide (Ac-WEHD-pNA)，釋放出游離的硝基苯胺pNA，后者呈黃色在405 nm具有吸收峰，用可見(jiàn)光分光光度比色方法測(cè)定，吸光度值對(duì)應(yīng)于Caspase-5的水解活性。反應(yīng)體系100微升，試劑盒提供的試劑，除標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)外可進(jìn)行50或100次樣品測(cè)定。

適用：測(cè)定哺乳動(dòng)物組織、細(xì)胞caspase-5活性。

組成與儲(chǔ)存：
1. 裂解緩沖液： 20 ml ，4 oC
2. 反應(yīng)緩沖液： 10 ml ，4 oC
3. 2 mM Ac-WEHD-pNA底物： 0.5 ml，－20 oC避光
4. 10 mM pNA標(biāo)準(zhǔn)品： 0.5 ml，－20 oC避光
以上標(biāo)出的量為100次檢測(cè)，50次檢測(cè)的試劑量減半。試劑常溫運(yùn)輸。到達(dá)后按要求儲(chǔ)存，1年內(nèi)穩(wěn)定。

所需儀器：
酶標(biāo)儀與96孔酶標(biāo)板；或可見(jiàn)光分光光度計(jì)配100μl容積的石英比色杯。
工作波長(zhǎng)：吸收波長(zhǎng)405 nm，如不具備也可在400~450 nm范圍內(nèi)測(cè)定。