貼壁細(xì)胞培養(yǎng)
細(xì)胞名稱:293T,人胎腎細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)條件:??DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) ?10%FBS
傳代方法:1:3~1:4傳代,一周1~2次?
凍存條件:細(xì)胞凍存液?
細(xì)胞處理方法:
1.?細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至狀態(tài)良好后灌滿培養(yǎng)基運(yùn)輸,獲得細(xì)胞后用酒精棉球擦拭瓶口消毒,然后在超凈臺(tái)中操作。
2.?如細(xì)胞生長(zhǎng)至70%-80%,將瓶中的培養(yǎng)基移入無(wú)菌瓶中留作培養(yǎng)使用,保留5-8mL培養(yǎng)基在37℃、5%的CO2的溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)至90%-100%后,按要求消化傳代。
3.?棄去培養(yǎng)基,用無(wú)菌PBS或者其他緩沖液清洗細(xì)胞2次,加入適量胰蛋白酶消化(EDTA胰酶),待細(xì)胞完全脫壁且細(xì)胞連接松散時(shí)再吹打,將細(xì)胞分離成單個(gè)后,加培養(yǎng)基混勻,分瓶培養(yǎng)。
特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))
1. 我們使用自產(chǎn)培養(yǎng)基及進(jìn)口血清培養(yǎng)細(xì)胞,在您拿回細(xì)胞后,如想更換其它品牌培養(yǎng)基,請(qǐng)依照逐次替換的原則,先保留培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,多日多次代逐步更換,以減輕對(duì)細(xì)胞的刺激。
2. 如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)拍照并聯(lián)系售后。
3. 細(xì)胞任何售后問(wèn)題,均需拍照存檔并在2周之內(nèi)及時(shí)聯(lián)系客服。
相關(guān)產(chǎn)品及貨號(hào):
高糖DMEM?(12100) ?????????????????????????????
細(xì)胞凍存液(24800) ???????????????????????????
1×PBS緩沖液(pH7.2- 7.4)(P1020)
0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液(T1300)?
關(guān)鍵字: 293T 人胎腎細(xì)胞系;細(xì)胞生物學(xué)
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