DNA 在自由基(如·OH)的攻擊下容易發(fā)生損傷,即脫氧戊糖遭到破環(huán),磷酸二脂鍵的斷裂,堿基的破環(huán)或脫落,便可進一步產(chǎn)生單鏈斷裂或雙鏈斷裂。將細胞固定于低熔點瓊脂糖中,取少量細胞涂在載玻片上,用堿高鹽溶液破壞細胞膜,再用堿溶液使 DNA 分子解旋。將載玻片置于電泳液中,在電場的作用下,DNA 分子向陽極移動。如果 DNA 損傷嚴重,碎片多,則電泳速度快。未受損傷的 DNA 大分子則由于細胞膜的阻隔,滯留在原處。用 PI 染色或銀染,可觀察到 DNA 受損的細胞形同彗星現(xiàn)象,作定性分析。也可用相關(guān)的軟件作定量分析。
自備試劑和儀器 低速離心機、水平電泳儀、熒光顯微鏡、37℃和 45℃恒溫水浴箱、載玻片、蓋玻片、平皿、微量移液器、1.5ml Microube、0.4mmol/LTris-HCl(pH7.5)緩沖液、PBS
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