產(chǎn)品名稱(chēng)
檸檬酸鈉緩沖液粉劑 (0.01mol/L, pH6.0)
Sodium Citrate Buffer with Powder (0.01mol/L, pH6.0)
產(chǎn)品規(guī)格
PH9017-1L
PH9017-2L
試劑保存
室溫密封保存，有效期 12 個(gè)月。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
細(xì)胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類(lèi)試劑固定后，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)抗原形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部 分抗原決定簇，同時(shí)蛋白之間發(fā)生交聯(lián)而使抗原決定簇隱蔽，導(dǎo)致免疫染色時(shí)染色信號(hào)減弱，甚至出現(xiàn)一些假 陰性染色結(jié)果。所以要求在進(jìn)行免疫組化染色時(shí)，需要先進(jìn)行抗原修復(fù)或暴露，即將固定時(shí)分子之間所形成的 交聯(lián)破壞，而恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。從而提高抗原的檢出率，降低背景染色，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
檸檬酸鈉緩沖液 0.01mol/L， pH6.0 是一種常用的抗原修復(fù)液，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用 多聚甲醛、甲醛或其它醛類(lèi)試劑固定后的抗原修復(fù)?？梢杂行コ╊?lèi)固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)，充分 暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。 通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理，而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理?？乖迯?fù)可以提高石蠟切片 的免疫染色效果，亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當(dāng)冰凍切片免疫染色效果不理想時(shí)，考慮進(jìn)行 抗原修復(fù)。
按照每個(gè)片子需要 10ml 抗原修復(fù)液計(jì)算，1L 抗原修復(fù)液可以用于 100 個(gè)樣本的抗原修復(fù)。
使用參考
本產(chǎn)品是干粉形式，使用前用去離子水或蒸餾水按產(chǎn)品規(guī)格溶解至 1L 或 2L，即可使用。
1. 對(duì)于石蠟切片：
a. 脫蠟：二甲苯 3 次，每次 3-5min→ 無(wú)水乙醇 2 次，每次 3-5min→ 95％乙醇 1 次，3-5min→ 90%乙醇 1 次，3-5min→ 75％乙醇 1 次，3-5min→ 蒸餾水洗 2 次，每次 3-5min。
b. 抗原修復(fù)：將切片浸泡在檸檬酸修復(fù)液中，95-100℃加熱約 15 min (加熱時(shí)間可以控制在 10-20 min 內(nèi)， 的加熱時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。檸檬酸修復(fù)液使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使 用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過(guò)多的水分蒸發(fā)。隨后大 約在 20-30 min 內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 min。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫 染色步驟。
2. 對(duì)于冰凍切片： 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 min。將切片浸泡在檸檬酸修復(fù)液中，95-100℃加熱約 15 min (加熱時(shí)間可以 控制在 10-20 min 內(nèi)，的加熱時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。檸檬酸修復(fù)液使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過(guò) 多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 min 內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 min。隨后即可 進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
3. 對(duì)于其它樣品的抗原修復(fù)，可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進(jìn)行。
注意事項(xiàng)
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