"HCC-LY5細胞系|人肝癌細胞
HS-C03６６９５９
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCC-LY5細胞系|人肝癌細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉/分）５分鐘，取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內取出flask內之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
RPE細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CCD-１１１２sk細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SNU-７１９細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HNEpC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
VMM３９細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
WK２５６細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
HCC-LY5細胞系|人肝癌細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
HSAEC１-KT細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
preB-６９７細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HHSteC細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
hUC-MSC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H１８３８細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：１：３-１：４傳代；每周換液２次。
OCI-LY１８細胞系；細胞生長特性：懸浮；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCC-LY5細胞系|人肝癌細胞
TSCCA細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NHDF細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：１：２傳代
SGC-７９０細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H４４１細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代
Fox-NY細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RAMOS細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣；細胞傳代方法：維持細胞濃度在２×１０５/ml-１×１０６/ml；根據細胞濃度每２-３天補液１次
AN３ CA細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：１：３-１：５傳代，２-３天換液１次。
SK-MEL-２細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：多邊形的；細胞傳代方法：１：３-１：６傳代，２-３天換液１次。
NCI-H５９６細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：４-１：８傳代；每周換液２-３次。
HepG２/C３A細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：３—１：６傳代，每周換液２次
NCI-H１１８４[H１１８４]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MOVAS細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PAXC-０１２細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：１：３傳代，３-４天傳１次
SK-NEP-１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H２１３５細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
WM-３５細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CBRH ７９１９細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
APRE-１９細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
KMST-６細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H１６１８細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：３-４天換液１次。
CNE細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內可長滿。
８９１０PM細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HFT-８８１０細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
G-４０２細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２-１：６傳代，每周２-３次。
BAC１.２F５細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HuTu ８０細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２—１：５傳代，每周換液２-３次
VP２６７細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
BpRc１細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：４-１：６傳代；每周換液２-３次。
NCI-H１６４８[H１６４８]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Reh細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞；細胞傳代方法：１：２傳代。３天內可長滿。
OVSAHO細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CEL細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Malme-３M細胞系；細胞生長特性：混合生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２天換液１次。
OK細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
３T３-F４４２A細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SNU-C１細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：每３-５天換液。
TMD８細胞系；細胞生長特性：懸浮；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HSAEC１-KT細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
BHK細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代，每周換液１-２次。
PK１５細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２—１：４傳代，每周換液２—３次
VERO細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
VERO細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
M-NFS-６０細胞系；細胞生長特性：懸浮；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
FBM細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PG４９細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
JOSK-M細胞系；細胞生長特性：懸??；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HuH-６細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。６-７天長滿。
HOPC-os細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
２９３ c１８細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：４-１：１０傳代；每周２次。
CMT-１６７細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：５傳代
RGM１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
DBTRG-０５MG細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：１：４-１：６傳代；每周換液２-３次。
NCI-H２４０５[H２４０５]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H２８[H２８]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Primary Epidermal Keratinocytes細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：圓形；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NG１０８-１５ [１０８CC１５]細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣 ；細胞傳代方法：１：６-１：１０傳代，每周換液２-３次
HCC-LY5細胞系|人肝癌細胞
GAK細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：８.４ x １０^４ cells / sq.cm.
CEL細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
８５０５C細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：１：６傳代
HCC-９７２４細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HMC-１細胞系；細胞生長特性：懸?。患毎螒B(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
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