"NCI-H719細胞系|人小細胞肺癌細胞 HS-C0366767 細胞背景資料:小細胞肺癌;骨髓轉(zhuǎn)移;女性 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H719細胞系|人小細胞肺癌細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 F-36P細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:每周2次換液 HSAS1細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 ChaGo-K-1細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:4-1:8傳代;每周換液2次。 MLMA細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞;細胞傳代方法:1:2傳代 NCI-H865[H865]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PAXC-003細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:3傳代,3-4天傳1次 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NCI-H719細胞系|人小細胞肺癌細胞 細胞生長特性:半貼壁 細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴模@種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 H1672細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 McA-RH777細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NS1細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SW-13細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 LICCF細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 BSMSCs細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H719細胞系|人小細胞肺癌細胞 AtT-20細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 ONS-76細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:2傳代 MHCC97-L(MHCC97L)細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hela細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次 ECA細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hepa1-6[Hepa1-6]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HCC-15細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PC-3MIE8細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 OUMS-27細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MLE-12細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HUP-T4細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 FRH-0201細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 IMCD3細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 OVCAR5細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MIA PaCa-2細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代; NCI-H146[H146]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SU-DHL-2細胞系;細胞生長特性:懸??;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HOC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CHP-100細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KMS26細胞系;細胞生長特性:懸??;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H2126細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,每周2-3次。 BIC-1細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hs 294T細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:混合星狀和多邊形;細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,2-3天換液1次。 HSC(Human Schwann)細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MIMVEC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HKF細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HFL細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PA-TU-8988S細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MKN7細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:2傳代 H.A.細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HUVECs細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 BC-023細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 LNCaP clone FGC細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 H9C2細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SNU-398細胞系;細胞生長特性:混合生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:3-1:6傳代;2-3天換液1次。 mpc-5細胞系;細胞生長特性:貼壁生長 ;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 NCI-H2405[H2405]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CFPAC-1細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:3-10傳代;2-3天換液1次。 SK-N-BE(2)-C細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 BJ細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代 SUSM-1細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SF126細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞;細胞傳代方法:1:3傳代;3-4天1次。 RA FLSs細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 RF952細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H1417[H1417]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MOLP-2細胞系;細胞生長特性:懸浮;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Neuro-2a[N2a,Neuro-2a]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MHCC97H細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H292細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:3-1:8傳代;2-3天換液1次。 CCD-966SK細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HTR8-S/Vneo細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HCCC9810細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H716[H716]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 EB1細胞系;細胞生長特性:懸浮生長 ;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代 THLE-2細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:3-1:6傳代;2-3天換液1次。 SUME-a細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H719細胞系|人小細胞肺癌細胞 Lu-165細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 COC1細胞系;細胞生長特性:貼壁生長 ;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 MHCC97-H細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:2傳代 293AD細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MC53細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 "
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