"KYSE50細胞系|低分化人食管鱗癌細胞 HS-C0366625 細胞背景資料:食管鱗癌;男性 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KYSE50細胞系|低分化人食管鱗癌細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 NCI-H1876細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:每周換液2次。 A2058細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:6-1:12傳代,2-3天換液1次。 L2細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SW480 [SW-480]細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PLMVEC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 LIXC-011細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 KYSE50細胞系|低分化人食管鱗癌細胞 細胞生長特性:貼壁 細胞培養(yǎng)無菌操作的演示:凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面;靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌,繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處,使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈,動作要輕、準確,不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管,防止交叉污染。玻璃器械洗消:一、新的玻璃器皿的洗消:自來水刷洗,除去灰塵。烘干、泡:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀中12小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干:12小時后立即用自來水沖洗,再用洗滌劑刷洗,自來水沖干凈后用烤箱烘干;泡酸、清洗:用清潔液浸泡12小時,然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗15次,最后蒸餾水沖洗3-5次和用雙蒸水過3次。烘干、包裝:洗干凈后先烘干,然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒:包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子,打開開關(guān)和安全閥,當蒸氣成直線上升時,關(guān)閉安全閥,當指針指向15磅時,維持20-30分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消:刷洗、烘干:使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中,泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈,然后烘干。泡酸、清洗:烘干后泡入清潔液(酸液),12小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗),再用蒸餾水沖洗3次。烘干、包裝:洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 NCI-H1238[H1238]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SW900細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CRL細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 R1800[RA]細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 bEnd.3[BEND3]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Daudi細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代 KYSE50細胞系|低分化人食管鱗癌細胞 NCI-H2085細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:3-1:6傳代 Kelly細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 T6-Swiss albino細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 TR146細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SRS-82細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hs888Lu細胞系;細胞生長特性:貼壁生長 ;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 U-937細胞系;細胞生長特性:懸?。患毎螒B(tài)特性:淋巴母細胞;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SRA01/04細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 BCP-1細胞系;細胞生長特性:懸浮生長 ;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣;細胞傳代方法:維持細胞濃度在2×105/ml-1×106/ml;根據(jù)細胞濃度每2-3天補液1次。 Hepa 1-6[Hepa1-6]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MODE-K細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hela-Ap-1細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 melan-a細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PF-382細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞;細胞傳代方法:1:2傳代 IPI-2I細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HCE-2 [50.B1]細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HUMSC細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hs 611.T細胞系;細胞生長特性:混合型;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代;每周換液2-3次。 RPTEC Cell細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:3—1:4傳代,每周換液2—3次 LAN-1細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 UO31細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:3-1:6傳代;2-3天換液1次。 Kit225-k6細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HMO6細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HLF-a細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞;細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2次。 SW837[SW-837]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 BV173細胞系;細胞生長特性:懸?。患毎螒B(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KMM1細胞系;細胞生長特性:懸??;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H9細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣;細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代 A673細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 BV2細胞系;細胞生長特性:半貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 OC-3-VGH細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 GDM-1細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣 ;細胞傳代方法:2-3天換液1次。 MN9D細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MDCK[NBL-2]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 G361細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HepG2[HepG2]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MA-104細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SNU475細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 GIST-430細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 C3H/10T1/2, Clone 8細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PAXC-002細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:3傳代,3-4天傳1次 HCSMC細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hs-746T細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SCC-15細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hs832.Tc細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 143TK-細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 C4-2B細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 COLO320DM[COLO320DM]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 BHK細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代,每周換液1-2次。 AKR細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hacat細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SN12C細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:2x10^4 cells/ml BMDC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 S180-V細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Colo738細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H920[H920]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KYSE50細胞系|低分化人食管鱗癌細胞 BRL3A細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 HEK-A細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 M-20細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 TNC-1B12B4細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 VSMC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 "
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