??????碧云天生產(chǎn)的抗熒光淬滅封片液(含PI) (Antifade Mounting Medium with PI)是一種含有核酸紅色熒光染料PI并能減緩熒光淬滅的封片試劑。本封片液不僅可以減緩各種常見熒光染料的熒光淬滅,還能在封片的同時可以對未通透處理細胞樣品中的壞死細胞進行特異性染色,或者對已經(jīng)進行通透處理細胞的細胞核等核酸密集處進行PI染色。正常細胞和凋亡細胞如果未經(jīng)通透處理,使用本產(chǎn)品時會呈現(xiàn)PI染色陰性。如果在封片前使用RNase A等RNase處理,可以充分降解RNA,并使PI主要染色富含DNA的細胞核。 ??????本封片液內(nèi)含Propidium Iodide簡稱PI,中文名為碘化丙啶,是一種可對DNA和RNA染色的核酸染色試劑,它是一種溴化乙啶的類似物,在嵌入雙鏈DNA或RNA后形成PI-DNA或PI-RNA復(fù)合物,發(fā)出紅色熒光。 ??????碘化丙啶PI是一種深紅色的固體粉末,分子式為C27H34I2N4,分子668.4,CAS number為25535-16-4。PI-DNA復(fù)合物的激發(fā)光和發(fā)射光波長分別為535nm和615nm。PI-DNA復(fù)合物的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考圖1。
圖1.?PI-DNA復(fù)合物的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。
??????盡管PI不能通過活細胞膜,但卻能穿過破損的細胞膜而對細胞核等染色,因此常用于細胞凋亡(apoptosis)和細胞壞死(necrosis)的檢測。PI也可用于普通細胞通透后的細胞核染色。 ??????本產(chǎn)品用于細胞染色的效果圖參考圖2。
??????圖2.?誘導(dǎo)壞死的HeLa細胞使用本產(chǎn)品染色實拍效果。左側(cè)圖是明場下HeLa細胞形態(tài)圖;右側(cè)為熒光顯微鏡下觀察到的細胞PI染色的效果圖,部分被PI染成紅色熒光的細胞,即為壞死細胞。
??????本品已加PI,可同時完成PI染色和封片,并能減緩熒光淬滅,實驗操作更簡單,只需在封片時用移液器滴一滴本產(chǎn)品在樣品上,蓋上蓋玻片即可完成操作。 ??????關(guān)于碧云天生產(chǎn)的各種封片液的主要特點和差異可參考我們的相關(guān)網(wǎng)頁: ??????http://www.beyotime.com/mounting-medium.htm。 ??????按照每個樣品封片需要50微升計算,5ml本產(chǎn)品足夠用于100個樣品的細胞核染色和封片,25ml本產(chǎn)品可以用于500個樣品的細胞核染色和封片。
包裝清單:
保存條件: ??????-20℃避光保存,一年有效。
注意事項: ??????需自備蓋玻片與載玻片,也可向碧云天訂購蓋玻片(FCGF18/FCGF20/FCGF22/FCGF24/FCGF30/FCGF32/FCGF40/FCGF50 /FCGF60)與載玻片(FSL004/FSL005/FSL006/FSL011/FSL012/FSL051)。 ??????熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,染色后的樣品宜避光保存??梢韵虮淘铺爝x購各種型號的載玻片存儲盒(FBX001/FBX002/FBX003 /FBX005/FBX011/FBX012/FBX024/FBX025/FBX049/FBX050/FBX099/FBX100)。 ??????本產(chǎn)品中PI的濃度經(jīng)過碧云天的優(yōu)化,確??梢詽M足各種常規(guī)染色的需要。如需使用特定濃度的PI,請選購碧云天的PI(ST511或ST512)。 ??????PI特異性染色壞死的基本原理時正?;虻蛲黾毎匀槐3旨毎さ耐暾?,因此需要在細胞膜未喪失其完整性時完成檢測,建議在染色后20-30min內(nèi)完成檢測。如果只是復(fù)染細胞核的話,可以通透細胞后,再使用本產(chǎn)品進行染色。對于組織切片本產(chǎn)品可以直接染色細胞核。 ??????在使用抗淬滅封片液的情況下可以減緩淬滅,但仍宜盡量避光。 ??????PI對人體有害,對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
碧云天生物技術(shù)有限公司
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