??????碧云天的NADP⁺/NADPH檢測(cè)試劑盒(WST-8法) (NADP⁺/NADPH Assay Kit with WST-8)是一種基于WST-8的顯色反應(yīng)，通過比色法來檢測(cè)細(xì)胞、組織或其它樣品中NADP⁺?(氧化型輔酶II)和NADPH?(還原型輔酶II)各自的量、比值和總量的檢測(cè)試劑盒。
??????NADP⁺/NADPH以及NAD⁺/NADH的傳統(tǒng)檢測(cè)方法是檢測(cè)NADPH或者NADH在340nm處吸收波長(zhǎng)的變化，該方法靈敏度較低并易受樣品中有類似紫外吸收物質(zhì)的干擾，并且在紫外檢測(cè)過程中通常需要加大檢測(cè)樣品量以彌補(bǔ)NADPH在340nm處吸光度過小的不足，因此該檢測(cè)方法具有很大的局限性。
??????WST-8是MTT的一種升級(jí)替代產(chǎn)品，和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先，MTT被一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶液來溶解；而WST-8和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的，可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次，WST-8產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn)定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比，線性范圍更寬，靈敏度更高。
??????WST-8和WST-1相比，檢測(cè)靈敏度更高，更易溶解，并且更加穩(wěn)定。
??????本試劑盒使用便捷，無需分離純化細(xì)胞、組織或其它樣品中的NADP⁺和NADPH，且特異性檢測(cè)NADP⁺和NADPH，而不檢測(cè)NAD⁺和NADH。本試劑盒可以檢測(cè)含量低至0.05μM?(2.5pmol)的NADP⁺或NADPH，在0.05μM?(2.5pmol)至6μM (300pmol)之間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。
??????NADP (Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸)是很多氧化還原反應(yīng)的輔酶，包括NADP⁺ (氧化型)和NADPH (還原型)兩種形式。NADP⁺也參與到生物合成反應(yīng)中，比如脂質(zhì)和核酸的合成。在動(dòng)物細(xì)胞中，戊糖磷酸途徑(pentose phosphate pathway，PPP)的氧化階段是NADPH最主要的來源。
??????本試劑盒可檢測(cè)樣品中的NADP⁺、NADPH以及它們的比值，具體原理如下：

??????本試劑盒適用于檢測(cè)細(xì)胞、組織以及其它適當(dāng)樣品中的NADP⁺和NADPH各自的量、比值和總量。

保存條件：
??????-20℃保存，一年有效。顯色液(S0179-2)和NADPH?(S0179-3)須-20℃避光保存。NADPH配制成溶液后，須適當(dāng)分裝后-80℃保存。所有試劑避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：
??????本試劑盒中的所有試劑均需要冷凍保存，請(qǐng)嚴(yán)格按照保存條件進(jìn)行保存。如果不是一次用完，為避免反復(fù)凍融導(dǎo)致產(chǎn)品失效，請(qǐng)適當(dāng)分裝后保存。
??????NADPH不太穩(wěn)定，取出NADPH后請(qǐng)盡快使用。如果發(fā)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不理想，很有可能是標(biāo)準(zhǔn)品發(fā)生了降解。
??????由于NADP⁺/NADPH提取液本身比較粘稠，以該提取液作為稀釋液時(shí)，無論對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品還是樣品進(jìn)行稀釋，在稀釋過程中務(wù)必保證稀釋均勻，否則易造成實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)產(chǎn)生較大波動(dòng)。
??????在樣品加樣和混勻過程中，須盡量避免產(chǎn)生氣泡，以免影響最終的吸光度測(cè)定。
??????如果不能非常嚴(yán)格地控制反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間，每次檢測(cè)都需要設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線。
??????如果樣品溶液中NADP⁺和NADPH濃度過高或過低，不在試劑盒的線性檢測(cè)范圍內(nèi)時(shí)，可適當(dāng)調(diào)整樣品或者提取液的用量。
??????由于NADP⁺和NADPH很不穩(wěn)定，在凍存過程中較易降解，所以宜盡量使用新鮮樣品進(jìn)行檢測(cè)。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。