| 產(chǎn)品編號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品包裝 |
產(chǎn)品價(jià)格 |
| D2626-100μg |
pCMV-C-EGFP (綠色熒光蛋白) |
100μg |
1086.00元 |
??????pCMV-C-EGFP是碧云天自行研發(fā)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒，用于表達(dá)C端含EGFP(Enhanced GreenFluorescent Protein, 增強(qiáng)綠色熒光蛋白)標(biāo)簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動(dòng)子，可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)。在多克隆位點(diǎn)的后面有一個(gè)EGFP的完整編碼序列，因此在多克隆位點(diǎn)根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達(dá)C端含有EGFP標(biāo)簽的融合蛋白。利用EGFP的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞內(nèi)定位，也可以利用EGFP抗體來檢測(cè)或免疫沉淀融合蛋白。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，可以使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。
??????pCMV-C-EGFP質(zhì)粒的主要信息如下：
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Feature Nucleotide
|
Position
|
|
CMV promoter
|
1-602
|
|
T3 promoter and T3 primer binding site
|
620-639
|
|
Multiple cloning site
|
651-740
|
|
EGFP
|
741-1460
|
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T7 promoter and T7 primer binding site
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1510-1531
|
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SV40 polyAsignal
|
1543-1926
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f1 origin of ss-DNA replication
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2064-2370
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bla promoter
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2395-2519
|
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SV40 promoter
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2539-2877
|
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Neomycin/kanamycin resistance ORF
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2912-3703
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|
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
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3704-4162
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pUC origin
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4291-4958
|
??????pCMV-C-EGFP質(zhì)粒(5010bp)的圖譜如下：
??????pCMV-C-EGFP的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下：
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SmaIPstI
|
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SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII
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651
|
GAGCTCCACC
|
GCGGTGGCGG
|
CCGCTCTAGC
|
CCGGGCGGAT
|
CCAAGCTTCT
|
|
|
CTCGAGGTGG
|
CGCCACCGCC
|
GGCGAGATCG
|
GGCCCGCCTA
|
GGTTCGAAGA
|
|
EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI EGFP
|
|
701
|
GCAGGAATTC
|
GATATCGTCG
|
ACAGATCTCT
|
CGAGTCTAGA
|
|
|
|
|
|
CGTCCTTAAG
|
CTATAGCAGC
|
TGTCTAGAGA
|
GCTCAGATCT
|
|
|
|
|
751
|
AGGGCGAGGA
|
GCTGTTCACC
|
GGGGTGGTGC
|
CCATCCTGGT
|
|
|
|
|
|
TCCCGCTCCT
|
CGACAAGTGG
|
CCCCACCACG
|
GGTAGGACCA
|
|
|
|
|
801
|
GGCGACGTAA
|
ACGGCCACAA
|
GTTCAGCGTG
|
TCCGGCGAGG
|
|
|
|
|
|
CCGCTGCATT
|
TGCCGGTGTT
|
CAAGTCGCAC
|
AGGCCGCTCC
|
|
|
|
|
851
|
TGCCACCTAC
|
GGCAAGCTGA
|
CCCTGAAGTT
|
CATCTGCACC
|
|
|
|
|
|
ACGGTGGATG
|
CCGTTCGACT
|
GGGACTTCAA
|
GTAGACGTGG
|
|
|
|
|
901
|
TGCCCGTGCC
|
CTGGCCCACC
|
CTCGTGACCA
|
CCCTGACCTA
|
|
|
|
|
|
ACGGGCACGG
|
GACCGGGTGG
|
GAGCACTGGT
|
GGGACTGGAT
|
|
|
|
|
951
|
TGCTTCAGCC
|
GCTACCCCGA
|
CCACATGAAG
|
CAGCACGACT
|
|
|
|
|
|
ACGAAGTCGG
|
CGATGGGGCT
|
GGTGTACTTC
|
GTCGTGCTGA
|
|
|
|
|
1001
|
CGCCATGCCC
|
GAAGGCTACG
|
TCCAGGAGCG
|
CACCATCTTC
|
|
|
|
|
|
GCGGTACGGG
|
CTTCCGATGC
|
AGGTCCTCGC
|
GTGGTAGAAG
|
|
|
|
|
1051
|
ACGGCAACTA
|
CAAGACCCGC
|
GCCGAGGTGA
|
AGTTCGAGGG
|
|
|
|
|
|
TGCCGTTGAT
|
GTTCTGGGCG
|
CGGCTCCACT
|
TCAAGCTCCC
|
|
|
|
|
1101
|
GTGAACCGCA
|
TCGAGCTGAA
|
GGGCATCGAC
|
TTCAAGGAGG
|
|
|
|
|
|
CACTTGGCGT
|
AGCTCGACTT
|
CCCGTAGCTG
|
AAGTTCCTCC
|
|
|
|
|
1151
|
CCTGGGGCAC
|
AAGCTGGAGT
|
ACAACTACAA
|
CAGCCACAAC
|
|
|
|
|
|
GGACCCCGTG
|
TTCGACCTCA
|
TGTTGATGTT
|
GTCGGTGTTG
|
|
|
|
|
1201
|
TGGCCGACAA
|
GCAGAAGAAC
|
GGCATCAAGG
|
TGAACTTCAA
|
|
|
|
|
|
ACCGGCTGTT
|
CGTCTTCTTG
|
CCGTAGTTCC
|
ACTTGAAGTT
|
|
|
|
|
1251
|
AACATCGAGG
|
ACGGCAGCGT
|
GCAGCTCGCC
|
GACCACTACC
|
|
|
|
|
|
TTGTAGCTCC
|
TGCCGTCGCA
|
CGTCGAGCGG
|
CTGGTGATGG
|
|
|
|
|
1301
|
CCCCATCGGC
|
GACGGCCCCG
|
TGCTGCTGCC
|
CGACAACCAC
|
|
|
|
|
|
GGGGTAGCCG
|
CTGCCGGGGC
|
ACGACGACGG
|
GCTGTTGGTG
|
|
|
|
|
1351
|
CCCAGTCCGC
|
CCTGAGCAAA
|
GACCCCAACG
|
AGAAGCGCGA
|
|
|
|
|
|
GGGTCAGGCG
|
GGACTCGTTT
|
CTGGGGTTGC
|
TCTTCGCGCT
|
|
|
|
|
1401
|
CTGCTGGAGT
|
TCGTGACCGC
|
CGCCGGGATC
|
ACTCTCGGCA
|
|
|
|
|
|
GACGACCTCA
|
AGCACTGGCG
|
GCGGCCCTAG
|
TGAGAGCCGT
|
|
|
ApaI
|
|
1451
|
|
GGGCCCGGTA
|
CCTTAATTAA
|
TTAAGGTACC
|
|
|
|
|
|
CCCGGGCCAT
|
GGAATTAATT
|
AATTCCATGG
|
??????pCMV-C-EGFP中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-EGFP)包括：
|
AclI
|
AfeI
|
AflII
|
AgeI
|
AhdI
|
AscI
|
AsiSI
|
|
BaeI
|
BbsI
|
BbvCI
|
BlpI
|
BmgBI
|
BsiWI
|
BsmBI
|
|
BspEI
|
BspQI
|
BssHII
|
BstEII
|
BstZ17I
|
EarI
|
EcoNI
|
|
FseI
|
NruI
|
PflMI
|
PmeI
|
PmlI
|
PpuMI
|
PshAI
|
|
PspXI
|
SapI
|
SbfI
|
ScaI
|
SgrAI
|
SpeI
|
SwaI
|
|
XcmI
|
XmnI
|
|
??????pCMV-C-EGFP中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pCMV-C-EGFP once)包括：
|
NdeI
|
CA`TA,TG
|
240
|
|
PspOMI
|
G`GGCC,C
|
1461
|
|
SnaBI
|
TAC|GTA
|
346
|
|
ApaI
|
G,GGCC`C
|
1461
|
|
CspCI
|
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
|
380
|
|
PvuI
|
CG,AT`CG
|
1541
|
|
NheI
|
G`CTAG,C
|
597
|
|
BclI
|
T`GATC,A
|
1697
|
|
BmtI
|
G,CTAG`C
|
597
|
|
MfeI
|
C`AATT,G
|
1790
|
|
SacI
|
G,AGCT`C
|
651
|
|
HpaI
|
GTT|AAC
|
1803
|
|
Eco53kI
|
GAG|CTC
|
653
|
|
MluI
|
A`CGCG,T
|
1926
|
|
BstXI
|
CCAN,NNNN`NTGG
|
659
|
|
BsaXI
|
,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN`
|
2087
|
|
SacII
|
CC,GC`GG
|
660
|
|
DraIII
|
CAC,NNN`GTG
|
2153
|
|
NotI
|
GC`GGCC,GC
|
668
|
|
SfiI
|
GGCCN,NNN`NGGCC
|
2812
|
|
TspMI
|
C`CCGG,G
|
680
|
|
StuI
|
AGG|CCT
|
2861
|
|
XmaI
|
C`CCGG,G
|
680
|
|
ClaI
|
AT`CG,AT
|
2880
|
|
SmaI
|
CCC|GGG
|
682
|
|
BspDI
|
AT`CG,AT
|
2880
|
|
BamHI
|
G`GATC,C
|
687
|
|
KasI
|
G`GCGC,C
|
3039
|
|
HindIII
|
A`AGCT,T
|
693
|
|
NarI
|
GG`CG,CC
|
3040
|
|
PstI
|
C,TGCA`G
|
699
|
|
SfoI
|
GGC|GCC
|
3041
|
|
EcoRI
|
G`AATT,C
|
705
|
|
PluTI
|
G,GCGC`C
|
3039
|
|
EcoRV
|
GAT|ATC
|
713
|
|
MscI
|
TGG|CCA
|
3122
|
|
SalI
|
G`TCGA,C
|
717
|
|
Tth111I
|
GACN`N,NGTC
|
3158
|
|
AccI
|
GT`MK,AC
|
718
|
|
PflFI
|
GACN`N,NGTC
|
3158
|
|
BglII
|
A`GATC,T
|
723
|
|
BsrDI
|
GCAATG,NN`
|
3271
|
|
XhoI
|
C`TCGA,G
|
729
|
|
RsrII
|
CG`GWC,CG
|
3556
|
|
PaeR7I
|
C`TCGA,G
|
729
|
|
BstBI
|
TT`CG,AA
|
3722
|
|
XbaI
|
T`CTAG,A
|
735
|
|
BsaI
|
GGTCTCN`NNNN,
|
4029
|
|
BcgI
|
,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN`
|
829
|
|
ApaLI
|
G`TGCA,C
|
4644
|
|
BsrGI
|
T`GTAC,A
|
1450
|
|
PciI
|
A`CATG,T
|
4958
|
??????pCMV-C-EGFP質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下：
??????T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
??????C-EGFP primer (852-873): 5′-GGGTCAGCTTGCCGTAGGTGGC-3′
??????pCMV-C-EGFP的全序列信息：D2626 pCMV-C-EGFP-seq.txt
??????pCMV-C-EGFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果請(qǐng)參考圖1。
??????圖1. pCMV-C-EGFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果圖。左側(cè)為明場(chǎng)照片，右側(cè)為熒光照片。
包裝清單:
|
產(chǎn)品編號(hào)
|
產(chǎn)品名稱
|
包裝
|
|
D2626-1μg
|
pCMV-C-EGFP (綠色熒光蛋白)
|
1μg
|
|
D2626-100μg
|
pCMV-C-EGFP (綠色熒光蛋白)
|
100μg
|
|
—
|
說明書
|
1份
|
保存條件：
??????-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
??????本質(zhì)粒未經(jīng)碧云天書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。