pET-N-GST-Thrombin-C-His

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包裝	100μg

最小起訂量	100μg
發(fā)貨地	上海
更新日期	2024-11-05

產(chǎn)品詳情

中文名稱:pET-N-GST-Thrombin-C-His	英文名稱:pET-N-GST-Thrombin-C-His
有效期: 一年	產(chǎn)品類別: 菌種與質(zhì)粒原核載體

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品包裝	產(chǎn)品價(jià)格
D2911-100μg	pET-N-GST-Thrombin-C-His	100μg	1086.00元

??????pET-N-GST-Thrombin-C-His是一種用于表達(dá)N端含GST標(biāo)簽(Glutathione?S-transferase?tag,?GST?tag)或C端含His標(biāo)簽(His?tag)的重組蛋白的原核表達(dá)質(zhì)粒，也可用于表達(dá)N端含GST標(biāo)簽并且同時(shí)C端含His標(biāo)簽的重組蛋白。GST和His雙標(biāo)簽有利于通過(guò)GST柱和鎳柱兩種方法來(lái)純化目的蛋白，使目的蛋白的純度更高。本質(zhì)粒N端GST標(biāo)簽后有Thrombin酶切位點(diǎn)，可通過(guò)Thrombin蛋白酶切除N端的GST標(biāo)簽。本質(zhì)粒為卡那霉素抗性。
??????本質(zhì)粒含有T7啟動(dòng)子/lac操縱子，可以在異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的誘導(dǎo)下高效啟動(dòng)目的蛋白表達(dá)。在多克隆位點(diǎn)的前面有一個(gè)GST標(biāo)簽的編碼序列，后面有一個(gè)His標(biāo)簽的編碼序列，后者含有6個(gè)組氨酸(6X?His)。因此在多克隆位點(diǎn)根據(jù)讀碼框插入不含終止密碼子的目的基因就可以表達(dá)N端含有GST標(biāo)簽并且C端含有His標(biāo)簽的目的蛋白。也可以在目的基因后面添加終止密碼子，這樣就可以表達(dá)僅在N端含有GST標(biāo)簽的目的蛋白。如果在NdeI和多克隆酶切位點(diǎn)之間按照讀碼框插入不帶有終止密碼子的目的基因，這樣就可以表達(dá)僅C端帶有His標(biāo)簽的目的蛋白。
??????本載體在N端GST標(biāo)簽與多克隆位點(diǎn)之間含有Thrombin蛋白酶識(shí)別的6肽序列LVPRGS，對(duì)應(yīng)的核酸序列為CTGGTTCCGCGTGGATCC，因此在目的蛋白純化后可以利用Thrombin酶切除N端的GST標(biāo)簽。Thrombin蛋白酶酶切發(fā)生在六肽序列的R和G之間，因此在酶切去除GST標(biāo)簽的時(shí)候會(huì)在目的蛋白的N端留下兩個(gè)額外的氨基酸殘基GS。
??????通?？梢圆捎萌鏐eyoGold??GST-tag?Purification?Resin?(P2251/P2253/P2255)、GST標(biāo)簽蛋白純化試劑盒(P2262)、BeyoGold??His-tag?Purification?Resin?(P2210/P2218/P2220)或His標(biāo)簽蛋白純化試劑盒(P2226)等純化本質(zhì)粒表達(dá)的目的蛋白，也可以使用GST抗體(AG768/AF0174)和His-tag抗體(AH367)檢測(cè)和少量地分離純化目的蛋白。
??????pET-N-GST-Thrombin-C-His質(zhì)粒(5955bp)的圖譜如下：

??????pET-N-GST-Thrombin-C-His質(zhì)粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
f1 origin	12-467
Kanamycin resistance ORF	563-1645
PBR 322 origin	2084
LacI coding sequence	3518-4597
T7 promoter	4988-5004
GST tag coding sequence	5076-5732
Thrombin recognition site sequence	5739-5756
Multiple cloning site(BamHI-XhoI)	5751-5798
His tag coding sequence	5799-5816
T7 Terminator	5884-5930

??????pET-N-GST-Thrombin-C-His的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下：

	XbaIrbsNdeI
5026	?AATTCCCCTC????TAGAAATAAT????TTTGTTTAAC????TTTAAGAAGG????AGATATACAT
	?TTAAGGGGAG????ATCTTTATTA????AAACAAATTG????AAATTCTTCC????TCTATATGTA
	GSTtag
5076	?ATGATGTCCC????CTATACTAGG????TTATTGGAAA????ATTAAGGGCC????TTGTGCAACC
	?TACTACAGGG????GATATGATCC????AATAACCTTT????TAATTCCCGG????AACACGTTGG
5126	?CACTCGACTT????CTTTTGGAAT????ATCTTGAAGA????AAAATATGAA????GAGCATTTGT
	?GTGAGCTGAA????GAAAACCTTA????TAGAACTTCT????TTTTATACTT????CTCGTAAACA

5176	?ATGAGCGCGA????TGAAGGTGAT????AAATGGCGAA????ACAAAAAGTT????TGAATTGGGT
	?TACTCGCGCT????ACTTCCACTA????TTTACCGCTT????TGTTTTTCAA????ACTTAACCCA

5226	?TTGGAGTTTC????CCAATCTTCC????TTATTATATT????GATGGTGATG????TTAAATTAAC
	?AACCTCAAAG????GGTTAGAAGG????AATAATATAA????CTACCACTAC????AATTTAATTG

5276	?ACAGTCTATG????GCCATCATAC????GTTATATAGC????TGACAAGCAC????AACATGTTGG
	?TGTCAGATAC????CGGTAGTATG????CAATATATCG????ACTGTTCGTG????TTGTACAACC

5326	?GTGGTTGTCC????AAAAGAGCGT????GCAGAGATTT????CAATGCTTGA????AGGAGCGGTT
	?CACCAACAGG????TTTTCTCGCA????CGTCTCTAAA????GTTACGAACT????TCCTCGCCAA

5376	?TTGGATATTA????GATACGGTGT????TTCGAGAATT????GCATATAGTA????AAGACTTTGA
	?AACCTATAAT????CTATGCCACA????AAGCTCTTAA????CGTATATCAT????TTCTGAAACT

5426	?AACTCTCAAA????GTTGATTTTC????TTAGCAAGCT????ACCTGAAATG????CTGAAAATGT
	?TTGAGAGTTT????CAACTAAAAG????AATCGTTCGA????TGGACTTTAC????GACTTTTACA

5476	?TCGAAGATCG????TTTATGTCAT????AAAACATATT????TAAATGGTGA????TCATGTAACC
	?AGCTTCTAGC????AAATACAGTA????TTTTGTATAA????ATTTACCACT????AGTACATTGG

5526	?CATCCTGACT????TCATGTTGTA????TGACGCTCTT????GATGTTGTTT????TATACATGGA
	?GTAGGACTGA????AGTACAACAT????ACTGCGAGAA????CTACAACAAA????ATATGTACCT

5576	?CCCAATGTGC????CTGGATGCGT????TCCCAAAATT????AGTTTGTTTT????AAAAAACGTA
	?GGGTTACACG????GACCTACGCA????AGGGTTTTAA????TCAAACAAAA????TTTTTTGCAT

5626	?TTGAAGCTAT????CCCACAAATT????GATAAGTACT????TGAAATCCAG????CAAGTATATA
	?AACTTCGATA????GGGTGTTTAA????CTATTCATGA????ACTTTAGGTC????GTTCATATAT

5676	?GCATGGCCTT????TGCAGGGCTG????GCAAGCCACG????TTTGGTGGTG????GCGACCATCC
	?CGTACCGGAA????ACGTCCCGAC????CGTTCGGTGC????AAACCACCAC????CGCTGGTAGG
	ThrombinPstI
	↓BamHI HindIIIEcoRIEcoRV
5726	?TCCAAAATCG????GATCTGGTTC????CGCGTGGATC????CAAGCTTCTG????CAGGAATTCG
	?AGGTTTTAGC????CTAGACCAAG????GCGCACCTAG????GTTCGAAGAC????GTCCTTAAGC
	SalIBglIIXhoIHistag
5776	?ATATCGTCGA????CAGATCTCTC????GAGCACCACC????ACCACCACCA????CTGAGATCCG
	?TATAGCAGCT????GTCTAGAGAG????CTCGTGGTGG????TGGTGGTGGT????GACTCTAGGC

??????pET-N-GST-Thrombin-C-His中沒(méi)有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pET-N-GST-Thrombin-C-His)包括：

AatII	Acc65I	AflII	AgeI	AhdI	AleI	AscI
AvrII	BaeI	BbvCI	BfuAI	BmgBI	BmtI	BsaI
BseRI	BsiWI	BspMI	BsrGI	Bsu36I	CspCI	EagI
Eco53kI	FseI	KpnI	MfeI	NcoI	NheI	NotI
PacI	PmeI	PmlI	PspXI	RsrII	SacI	SacII
SbfI	SexAI	SfiI	SnaBI	SpeI	SrfI	StuI
ZraI

??????pET-N-GST-Thrombin-C-His中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pET-N-GST-Thrombin-C-His once)包括：

DraIII	CAC,NNN`GTG	242	BstEII	G`GTNAC,C	4060
PsiI	TTA\|TAA	370	MluI	A`CGCG,T	4242
PvuI	CG,AT`CG	943	BstAPI	GCAN,NNN`NTGC	4563
AsiSI	GCG,AT`CGC	943	SphI	G,CATG`C	4771
SmaI	CCC\|GGG	1067	SgrAI	CR`CCGG,YG	4923
XmaI	C`CCGG,G	1067	XbaI	T`CTAG,A	5034
TspMI	C`CCGG,G	1069	NdeI	CA`TA,TG	5074
NruI	TCG\|CGA	1286	MscI	TGG\|CCA	5286
AcuI	CTGAAG(N)₁₄,NN`	1597	BstBI	TT`CG,AA	5476
AlwNI	CAG,NNN`CTG	1729	SwaI	ATTT\|AAAT	5506
BssSI	C`ACGA,G	1968	ScaI	AGT\|ACT	5652
BstZ17I	GTA\|TAC	2374	BamHI	G`GATC,C	5751
Tth111I	GACN`N,NGTC	2399	HindIII	A`AGCT,T	5757
PflFI	GACN`N,NGTC	2399	PstI	C,TGCA`G	5763
PpuMI	RG`GWC,CY	3136	EcoRI	G`AATT,C	5769
FspI	TGC\|GCA	3164	EcoRV	GAT\|ATC	5777
BglI	GCCN,NNN`NGGC	3182	SalI	G`TCGA,C	5781
PshAI	GACNN\|NNGTC	3401	BglII	A`GATC,T	5787
HpaI	GTT\|AAC	3740	XhoI	C`TCGA,G	5793
BssHII	G`CGCG,C	3831	PaeR7I	C`TCGA,G	5793
ApaI	G,GGCC`C	4035	BlpI	GC`TNA,GC	5872
PspOMI	G`GGCC,C	4035	StyI	C`CWWG,G	5894
NmeAIII	GCCGAG(N)₁₉,NN`	4041

??????pET-N-GST-Thrombin-C-His質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下：
??????pET-F primer (5619-5638): 5′- AAACGTATTGAAGCTATCCC-3′
??????pET-R primer (5869-5888): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′
??????pET-N-GST-Thrombin-C-His的全序列信息：D2911 pET-N-GST-Thrombin-C-His.txt。
??????不同原核表達(dá)質(zhì)粒的比較和選擇，以及標(biāo)簽、蛋白酶切位點(diǎn)和蛋白共表達(dá)的考慮可以參考如下網(wǎng)頁(yè)：
??????http://www.beyotime.com/support/prokaryotic-plasmids.htm
包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
D2911-1μg	pET-N-GST-Thrombin-C-His	1μg
D2911-100μg	pET-N-GST-Thrombin-C-His	100μg
—	說(shuō)明書	1份

保存條件：
??????-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
??????本質(zhì)粒未經(jīng)碧云天書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

關(guān)鍵字： pET-N-GST-Thrombin-C-His

公司簡(jiǎn)介

碧云天由美國(guó)哈佛大學(xué)的留學(xué)人員創(chuàng)辦于2001年，為上海市高新技術(shù)企業(yè)，公司核心團(tuán)隊(duì)由來(lái)自美國(guó)哈佛大學(xué)、NIH、UCLA、香港大學(xué)、南京大學(xué)、中國(guó)科技大學(xué)、中國(guó)科學(xué)院等著名大學(xué)和科研機(jī)構(gòu)的高水平科研人員及默克、諾華等頂尖醫(yī)藥企業(yè)的管理人員組成。十多年來(lái)，碧云天已經(jīng)成為世界一流的生物、醫(yī)學(xué)研究用試劑、試劑盒和消耗品的研發(fā)和生產(chǎn)企業(yè)，同時(shí)提供生命科學(xué)研究的技術(shù)服務(wù)和一站式實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備采購(gòu)平臺(tái)。目前已有近50000篇注明使用碧云天產(chǎn)品的研究論文發(fā)表在包括Nature、Cell等國(guó)際高水平學(xué)術(shù)期刊，日均逾33.37篇！碧云天將繼續(xù)致力于科研用技術(shù)和產(chǎn)品的研發(fā)，用我們最頂尖的技術(shù)、最成熟的產(chǎn)品、最熱情的服務(wù)，服務(wù)科研人員，造福生命健康

成立日期	2007-07-19 （18年）	注冊(cè)資本	1000.000000萬(wàn)人民幣
員工人數(shù)	500人以上	年?duì)I業(yè)額	￥ 500萬(wàn)-1000萬(wàn)
主營(yíng)行業(yè)	生化試劑,核苷，核苷酸，寡核苷酸,抗體,蛋白組學(xué),生物活性小分子	經(jīng)營(yíng)模式	試劑

碧云天生物技術(shù)有限公司

非會(huì)員

公司成立：18年
注冊(cè)資本：1000.000000萬(wàn)人民幣
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