??????pUCm-T載體(pUCm-T Vector)是用于克隆含有A末端PCR產物的理想載體。可以通過藍白斑篩選有插入片段的重組克隆。
??????很多DNA聚合酶在進行PCR擴增時會在PCR產物雙鏈DNA每條鏈的3'端加上一個突出的堿基A。pUCm-T載體是一種已經線性化的載體，載體每條鏈的3'端帶有一個突出的T。這樣，pUCm-T載體的兩端就可以和PCR產物的兩端進行正確的AT配對，在連接酶的催化下，就可以把PCR產物連接到pUCm-T載體中，形成含有目的片段的重組載體。

??????pUCm-T載體的圖譜如圖1：

圖1. pUCm-T載體圖譜示意圖

??????pUCm-T載體的多克隆位點的詳細序列如下(請?zhí)貏e注意其中的Pst I不是單酶切位點)：

??????pUCm-T載體中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pUCm-T)包括：

??????pUCm-T載體中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pUCm-T once)包括：

??????pUCm-T載體的全序列信息：?D2006 pUCm-T vector-seq.txt
??????pUCm-T載體是在pUC19載體的基礎上改造而成，除多克隆位點外，其余序列同pUC19(GenBank Accession Number
M77789)。
??????少量自連的載體轉化得到的克隆由于編碼了LacZ基因，而在IPTG/X-Gal平板上呈現藍色。大部分重組的載體，由于插入片段破壞了LacZ基因，因而在IPTG/X-Gal平板上轉化得到白色克隆。這樣就可以通過藍白斑非常容易地篩選出重組克隆，藍白斑篩選結果示意圖如圖2。

??????圖2. pUCm-T載體的藍白斑篩選結果示意圖。pUCm-T載體和PCR產物片段進行連接，轉化后在IPTG/X-Gal平板的上長出的克隆，其中白色克隆代表PCR產物片段可能插入到pUCm-T載體中，但后續(xù)還需要酶切、PCR或者測序確認。

??????對于重組的質粒可以使用載體多克隆位點上的兩個PstI酶切位點進行PstI單酶切鑒定，也可以使用廉價且高效的EcoRI、
BamHI、XbaI、HindIII等內切酶進行雙酶切鑒定。
??????構建完成的質粒可以通過質粒上的正反兩個M13引物位點進行測序或通過T7 promoter上的T7引物位點進行測序。
??????構建完成的質粒可以利用T7 RNA polymerase promoter進行體外轉錄，用于探針標記等。
??????一個包裝的本載體共可以進行20次連接反應。
包裝清單：

保存條件：
??????-20℃保存。
注意事項：
??????本質粒未經碧云天書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。
??????DNA聚合酶是否可以在PCR產物3'端加A需參考該DNA聚合酶的說明。對于PCR產物為平端的情況，不適合用于T載體的連接反應。對于平端的PCR產物可以先進行在3'端加A的反應，再用T載體進行克隆。
??????進行PCR產物克隆時需自備連接、轉化等相關試劑、試劑盒。
??????本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
??????為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。