"HCC94|人子宮鱗癌細胞

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

HCC94 Cell

55408-10-1

傳代24h-48h處于對數(shù)期的細胞，在凍存前24h換液；按照常規(guī)方法消化，離心，收集細胞沉淀；用血清重懸細胞沉淀，用血球計數(shù)板或者細胞計數(shù)儀進行細胞計數(shù)；配制細胞凍存液，將凍存液加到細胞液中，吹打混勻，控制細胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml；將細胞懸液按照1ml/支分裝至已標記好的凍存管中，旋緊管蓋；將凍存管放入程序凍存盒中，凍存盒立即移至-80°C冰箱中，過夜后將凍存細胞移至液氮中長期保存。凍存管內(nèi)細胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細胞凍存和復蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。細胞凍存時細胞狀態(tài)不佳，會嚴重影響復蘇時細胞的活率。一般選擇處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存，凍存前一天細胞進行換液；消化過度也會嚴重影響細胞凍存后復蘇的活率；凍存細胞時為按照溫度梯度進行操作，會嚴重影響細胞活率。

HCC94|人子宮鱗癌細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

EOL-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸??；細胞背景資料：急性髓系白血病；男性

UM-RC-2細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腎透明細胞癌

786-O細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：該細胞源自一位原發(fā)性腎透明細胞癌患者。該細胞有微絨毛和橋粒，能在軟瓊脂上生長。此細胞生成一種PTH（甲狀旁腺素）樣的多肽，與乳癌和肺癌中生成的肽相似，其N端序列與PTH相似，具有PTH樣活性，分子量為6000D。

HUV-EC-C細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

2E8細胞系；細胞傳代方法：2-4天換液1次；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣　；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

CNE1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：鼻咽癌；高分化

A3細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

HCC94|人子宮鱗癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

L5178YTK+/-clone(3.7.2C)細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HLF細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

CEM-3G-2細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-H841細胞系；細胞傳代方法：1：3—1：5傳代，；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：混合型生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

KE-39細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

幾種實驗室細胞培養(yǎng)基成分的作用：１)NaHCO３的作用是什么？與CO２一起形成緩沖系統(tǒng)，保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定；２)酸鈉的作用是什么？酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝酸鈉。酸鈉的貯存液濃度一般為５０mM，-２０℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為１mM；３)加入HEPES有何好處？培養(yǎng)基中最常用的Buffer system是碳酸鹽，它可提供營養(yǎng)，但卻在生理PH值條件下會降低緩沖能力。而HEPES是一種很強的Buffer，加入HEPES能使細胞培養(yǎng)基在PH７.２-７.６條件下緩沖能力增強。Hepes的貯存液濃度一般為１M，常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為２５mM，即５ml １M的Hepes加入到２００ml完全培養(yǎng)基中；４)紅的作用是什么？紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色；５)谷酰胺的作用是什么？幾乎所有的細胞對谷酰胺都有膠高的要求。谷酰胺脫掉基后，可作為培養(yǎng)細胞的能量來源，參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時，細胞生長不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應置-２０℃冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷酰胺的液體培養(yǎng)基４度冰箱儲存兩周以上時，應重新加入原來量的谷酰胺。試驗操作中常配制高濃度(１００倍)的谷酰胺溶液(１ml/支)，分裝使用，-２０℃保存。使用時，每支１ml的谷酰胺加入到９９ml完全培養(yǎng)基中，使其終濃度為２mM培養(yǎng)基。

HEK-2細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

786-O[786-0]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

KOPN-8細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸?。患毎尘百Y料：B淋巴細胞白血?。慌?/div>