"Hi-five|昆蟲細胞

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書

細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

Hi-five Cell

14208-83-4

一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過高超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關(guān)。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。

Hi-five|昆蟲細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

C8-D1A細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長??；細胞背景資料：該永生化細胞系源自出生8天小鼠小腦組織，由B Pessac, D Trisler建立。該細胞具有小神經(jīng)膠質(zhì)細胞特征。該細胞為GFAP陽性細胞，除此之外，沒有檢測到其它神經(jīng)膠質(zhì)神經(jīng)元或小神經(jīng)膠質(zhì)細胞的分子標記。

SW 1783細胞系；細胞傳代方法：1：3-1：4傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

C33A細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長??；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

hUC-MSC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：臍帶；間充質(zhì)干細胞

Hs 274.T細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代,每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Pfeiffer細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

FaDu細胞系；細胞傳代方法：消化3-5分鐘。1：2。3天內(nèi)可長滿；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：1968年從一位印度下咽骨腫瘤患者的鉆孔活組織切片中建立了FaDu細胞株。在建立的細胞株中發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)中含有成束的細絲，并且細胞分界上的橋粒特別突出。

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

Hi-five|昆蟲細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

NCI-H1435[H1435]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

J82細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：電子顯微鏡下未觀察到橋粒但觀察到數(shù)目不同的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和突出微絲。 含ras (H-ras)癌基因。

LTPA細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

ZYM-SVEC01細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：靜脈血管內(nèi)皮細胞

Nthy-ori3-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下：１)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當然會變堿。如果不燒瓶口的話，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿，因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)，其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底，超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈；２)不要頻繁看細胞。對于初學(xué)者而言，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍，形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經(jīng)?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?，細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長；３)不要怕消化。在傳代的時候，初學(xué)者往往生怕細胞消化過度，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來，用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候，３７度消化過夜，細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有，動作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應(yīng)力相當大，對細胞的傷害也是很大的。

ECV-304[ECV304,ECV304]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Hs 739.T細胞系；細胞傳代方法：1：2—1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：混合型；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Hs 739.T細胞系；細胞傳代方法：1：2—1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：混合型；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Bel-7405細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

SNU-878細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Hela S3細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：該細胞是1955年由PuckTT,MarcusPI和CieciuraSJ建系的，含HPV-18序列；角蛋白陽性；可用于與染色體突變、細胞營養(yǎng)、集落形成相關(guān)的哺乳動物細胞的克隆分析。

H-4-Ⅱ-E細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

AM-38細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

SNB19細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：星形膠質(zhì)瘤；男性

Jurkat,Clone E6-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

FRH-0201細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：膽管癌

DMS-153細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：聚團懸?。患毎L特性：懸浮生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-H510細胞系；細胞傳代方法：1：3-1：8傳代；每周換液2次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：混合生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

AML12細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-H1668細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：小細胞肺癌

Hi-five|昆蟲細胞

SJCRH30細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

SU-DHL-6細胞系；細胞傳代方法：1：3—1：6傳代，3—4天換液1次；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣；細胞生長特性：懸浮生長 ；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HME6細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

RL細胞系；細胞傳代方法：每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣；細胞生長特性：懸浮生長 ；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HMSC-bm細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

C643細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：甲狀腺未分化癌；男性

SW579 [SW 579;SW-579]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：甲狀腺鱗癌；男性

NCI-H1993[H1993]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

SP2/0細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：半貼壁；細胞背景資料：骨髓瘤；BALB/c

A101D細胞系；細胞傳代方法：1：4-1：6傳代，2-3天換液1次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

MES-13細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

COLO 320細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Hs 274.T細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代,每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

GCT細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：4傳代；每周換液2次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

P388細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

LS 174T細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：該細胞是LS 180結(jié)腸腺癌細胞株的胰蛋白酶化變種。它比親本更易傳代，像LS 180一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。電鏡研究表明，它有豐富的微絲和胞漿黏液素液泡；血清學(xué)檢測直腸抗原3陽性；p53抗原表達陰性，但mRNA表達陽性；角蛋白陽性；癌基因c-myc、N-myc、H-ras、N-ras、Myb和fos的表達呈陽性；癌基因k-ras和sis的表達未做檢測；可產(chǎn)生IL-10、IL-6和黏蛋白。

HFB細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：皮膚成纖維細胞

A-204[A204]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Panc08.13細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

H125細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Walker256-TC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：乳腺癌；雌性

A-375細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：A375源自一位54歲女性，是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在瓊脂上形成克隆。

NCI-H460[H460]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

ME-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸浮；細胞背景資料：急性髓系白血?。荒行?/div>