"FHs 74 Int|人小腸正常細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：小腸

細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

FHs 74 Int Cell

6945-68-2

一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過(guò)高時(shí)，易造成培養(yǎng)基中細(xì)胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細(xì)胞傳代時(shí)建議用0.05%的胰酶進(jìn)行消化，對(duì)于難消化的細(xì)胞可采用0.25%胰酶進(jìn)行消化，細(xì)胞密度過(guò)高超過(guò)80%時(shí)，采用分步消化法。胰酶儲(chǔ)存在-20°C，解凍在4°C進(jìn)行，次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中，保存于-20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機(jī)會(huì)。胰酶消化的程度是細(xì)胞培養(yǎng)中的一個(gè)關(guān)鍵步驟：消化過(guò)度細(xì)胞碎片增多，黑渣子增多，細(xì)胞會(huì)成片脫落，嚴(yán)重影響細(xì)胞活性，并有部分細(xì)胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細(xì)胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會(huì)損傷細(xì)胞活性。不同細(xì)胞對(duì)消化液的敏感性不同，胰酶消化的時(shí)間也會(huì)有差異。胰酶消化時(shí)間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲(chǔ)存時(shí)間，胰酶的儲(chǔ)存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細(xì)胞的密度有關(guān)。對(duì)于新購(gòu)買的細(xì)胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細(xì)去摸索一下消化時(shí)間，可每隔1分鐘鏡下觀察細(xì)胞是否變圓，記錄消化時(shí)間，下一次操作參考之前的記錄來(lái)控制時(shí)間即可。

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細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

HT 1197細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

CCD-1112sk細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

WIL2-S[WIL2S]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

B16F1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

RMC-1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：視網(wǎng)膜；Muller細(xì)胞；SD

hTERT-RPE1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：視網(wǎng)膜色素上皮；hTERT永生；女性

NCI-H157細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

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細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

NCI-H3255細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HOC細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：肝；卵圓細(xì)胞

NCI-H2444[H2444]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

PG-LH7細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HIEC細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：腸；上皮細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)培養(yǎng)基選購(gòu)基本指南：如何選擇培養(yǎng)基：經(jīng)常聽(tīng)到有人問(wèn)，這種細(xì)胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實(shí)這個(gè)問(wèn)題的答案可以很簡(jiǎn)單，也可以好復(fù)雜。為什么這樣說(shuō)呢?如果這種細(xì)胞是購(gòu)自一些細(xì)胞庫(kù)，那很簡(jiǎn)單，問(wèn)供應(yīng)商就行了。或者找到相關(guān)的文獻(xiàn)，作為參考。培養(yǎng)基這么多種，要選擇起來(lái)也是個(gè)頭疼的事情。除了部分培養(yǎng)基是公開(kāi)配方的，或者是專門針對(duì)某一種細(xì)胞的，如昆蟲(chóng)基本培養(yǎng)基和神經(jīng)祖細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基， 但是大部分液體培養(yǎng)基都是專利配方的，也就是說(shuō)其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻(xiàn)、讓供應(yīng)商推薦，然后用自己的細(xì)胞做幾次傳代培養(yǎng)來(lái)選出最合適的培養(yǎng)基。畢竟實(shí)踐出真知。怎么樣才可以買到好的培養(yǎng)基產(chǎn)品：首先，當(dāng)然需要找對(duì)品牌，其次是找對(duì)自己所在區(qū)域的品牌代理商，針對(duì)自己所養(yǎng)的細(xì)胞，咨詢供應(yīng)商該選用哪種的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，這樣就可以買到好的而且適合自己的培養(yǎng)基產(chǎn)品。關(guān)于培養(yǎng)基品牌，目前公司所知道的高校實(shí)驗(yàn)室有些同學(xué)在用Corning系列培養(yǎng)產(chǎn)品，也有同學(xué)在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的產(chǎn)品。培養(yǎng)基的選擇和使用；MEM：成分簡(jiǎn)單，貼壁細(xì)胞；DMEM：分高糖型和低糖型；IDMEM：適合細(xì)胞密度低，生長(zhǎng)困難的細(xì)胞。如雜交細(xì)胞的篩選，DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選培養(yǎng)；RPM１６４０：應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，主要針對(duì)淋巴細(xì)胞，也適合其他細(xì)胞；１９９、１０９培養(yǎng)基：成分齊全，培養(yǎng)效果較好；F１０培養(yǎng)基：適合小鼠及人類二倍體細(xì)胞培養(yǎng)；F１２培養(yǎng)基：適合單細(xì)胞分離培養(yǎng)及無(wú)血清培養(yǎng)；McCoy’s５A(chǔ)培養(yǎng)基：特別適合原代細(xì)胞及較難培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)。

BMSCs細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

KHYG-1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸??；細(xì)胞背景資料：NK細(xì)胞淋巴瘤/白血?。慌?/div>