"T2細胞：人淋巴母細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

T2 Cell

細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣

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我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT15, LS411和KM12，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般100 mm dish，一次最多加入500ul，就足夠了，一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過5min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙狀移動。

T2細胞：人淋巴母細胞

細胞生長特性：懸浮生長

HB611細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：肝母細胞癌；男性

ECV-304[ECV304,ECV304]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

NCI-H211細胞系；細胞傳代方法：3-4天換液1次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

LLC-PK1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腎；自發(fā)永生；Hampshire

HCT-8 [HRT-18]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：結腸腺癌；男性

解凍細胞出現大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：1)冷凍時細胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后，立即將凍存管浸入在37℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉移到預熱的培養(yǎng)基中；2)不適當的冷凍過程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當的技術，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：1)培養(yǎng)瓶的大?。阂话憬鉀Q方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細胞密度上升；如，根據培養(yǎng)基的體積，從T75培養(yǎng)瓶轉移到2或3個T25培養(yǎng)瓶中；2)細胞密度過低：通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。

HConEpic細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：結膜；上皮細胞

MDBK(NBL-1)細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腎；自發(fā)永生；雄性

AKR細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：食管癌；AKR

HSMC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：骨骼肌

STC-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：STC-1細胞來源于雙重轉基因小鼠的腸腫瘤組織。含有連接大鼠胰島素基因啟動子與多瘤病毒小T抗原的融合基因與含有連接大鼠胰島素基因與SV40的基因結合產生雙轉基因小鼠。這些小鼠一般患有腸腫瘤以及胰腺β細胞瘤。STC-1細胞產生激素分泌素。

L-540 Hodgkin細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

T2細胞：人淋巴母細胞

細胞產品包裝：復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉數分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后，將血清放入，待溫度升高到56℃后計時，一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

T2細胞：人淋巴母細胞

細胞傳代方法：1：3—1：6傳代，每周換液2—3次

動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹：1)CO2培養(yǎng)箱：CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染，因此，CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要；2)烘箱(干燥箱)：用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時，烘箱內溫度一般要達到160℃以上，通常使用鼓風式烘箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好，缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應鼓風與升溫同時開始，至100℃時，停止鼓風。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門，以免驟冷導致玻璃器皿破裂，應等溫度自然下降至100℃以下后可開門。3)超凈工作臺/生物安全柜：細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細胞操作時，一般需要在100級空氣質量條件下進行，因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。4)液氮罐：為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細胞可以保存十年具有活性。5)超低溫冰箱：細胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般4℃下存放30min，轉放-20℃ 1 hour，再轉入-70至-80℃過夜，之后才可以轉移到液氮內(-196℃)，這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數月，對于不需要長期凍存的細胞，可暫時放于超低溫冰箱保存。6)恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞?7℃水浴中快速復蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。7離心機：細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞，所以需要配置低速的常溫離心機，對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。除上述儀器外，移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。

H4-II E細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

NCI-H2228[H2228]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

HTR8-S/Vneo細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

HA細胞系；細胞傳代方法：消化3-5分鐘，1：2,3天內可長滿；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

RF952細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

HUCEC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：宮頸；上皮細胞

KLE細胞系；細胞傳代方法：1：3傳代，3-4天換液一次；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：該細胞源自64歲子宮內膜癌女性患者

T2細胞：人淋巴母細胞

NCI-H1869[H1869]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

H4-II-E-C3細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：在糖皮質激素、胰島素或cAMP衍生物的誘導下可以產生酪酸基轉移酶；可被逆轉錄病毒感染；可產生白蛋白、轉鐵蛋白、凝血酶原；在AxC大鼠中可以成瘤。

FM88細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

KBM5細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸??；細胞背景資料：慢性髓白血?。慌?/div>