"KM12-SM細胞：人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

KM12-SM Cell

細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書

105942-10-7

細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶。【材料和試劑】1)無菌生理緩沖液(PBS)；2)胰酶-EDTA溶液(0.05%胰酶-0.53mM EDTA-4Na): 以10ml分裝于15 ml無菌離心管中，保存于–20℃，使用前放在37℃水槽回溫；3)新鮮培養(yǎng)基；4)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準(zhǔn)備操作】1)預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；2)用75％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；3)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；4)點燃酒精燈：注意火焰不能太?。?)準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；6)取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)；7)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；8)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。

KM12-SM細胞：人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細胞

細胞生長特性：貼壁

OKa-C-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

bend.3細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

BT20細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：乳腺導(dǎo)管癌；女性

MPP 89細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

U87MG細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，37度孵箱培養(yǎng)2-3天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。

humanPNT1A細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HPAEpiC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：肺泡；上皮細胞

U-87 MG細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：該細胞系由Ponten J等建立，源于惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤。裸鼠皮下接種可成瘤。

NCI-H345[H345]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

EM-3細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸浮；細胞背景資料：髓系白血病；女性

HCT-15細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

KM12-SM細胞：人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細胞

細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用75％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準(zhǔn)確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀中12小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：12小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡12小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗15次，最后蒸餾水沖洗3-5次和用雙蒸水過3次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向15磅時，維持20-30分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，12小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗3次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。

細胞背景資料：結(jié)腸癌

KM12-SM細胞：人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細胞

細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

以下對初次培養(yǎng)細胞人員來說，是非常好的開門教程：準(zhǔn)備室的設(shè)備：單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺；配液室的設(shè)備：扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)；培養(yǎng)室的設(shè)備：液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-80℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實驗記錄)；必須放在無菌間的設(shè)備：離心機(收集細胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無菌室的滅菌：定期打掃無菌室：每周打掃一次，先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等，然后用3‰來蘇爾或者新潔爾滅或者0.5％擦拭；CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌：先用3‰新潔爾滅擦拭，然后用75％酒精擦拭或者0.5％，再用紫外燈照射；實驗前滅菌：打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘；實驗后滅菌：用75％酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺；實驗人員的無菌準(zhǔn)備：肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用75％酒精棉球擦凈雙手。

DH82細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腎；Golden Retrieve

T84細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：4傳代；每周2次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞，多角；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：T84細胞株是從一位72歲男性結(jié)腸癌患者的肺轉(zhuǎn)移灶建立的可移植人類癌細胞株。 腫瘤組織皮下接種于BALB/c裸鼠，并連續(xù)進行移植。 [26072］ 在裸鼠身上的移植過程中，細胞株始終保持結(jié)腸癌的原始組織性狀。 [26072］ 在無胸腺小鼠中傳代23代后建立了T84細胞株。 這些細胞單層生長到飽和并在接觸細胞間展現(xiàn)出緊密連接和橋粒。 [1155] 有很多關(guān)于多肽類激素和神經(jīng)遞質(zhì)并維持定向電解質(zhì)傳輸?shù)氖荏w。 [1155］ 這株細胞展現(xiàn)了接觸細胞中的緊密連接和橋粒。 [1155］ 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。

HT 1197細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Reh細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代。3天內(nèi)可長滿；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

U-CH1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：骶骨脊索瘤；男性

NCI-H196[H196]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-H209細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：4傳代；每周換液2次；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：懸浮生長，有少數(shù)細胞疏松貼壁；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

KM12-SM細胞：人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細胞

DT40細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長??；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

FU97細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HSC-2細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HTEpiC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

RAG細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腎癌；BALB/c

MKN7細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Ha Fe細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Mv 1 Lu(NBL-7)細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

FD-LSC-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：喉鱗癌；男性

MV4-11細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-295R細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-H2135[H2135]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NEC8細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：睪丸胚胎性癌；男性

RAJI細胞系；細胞傳代方法：維持細胞濃度在4×105/ml-3×106/ml；根據(jù)細胞濃度每2-3天補液1次；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣；細胞生長特性：懸浮生長；細胞背景資料：Raji細胞由PulvertaftRJV于1963年從一位11歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt淋巴瘤中分離建立的，是個人類造血系統(tǒng)的連續(xù)傳代細胞，為B細胞起源。該細胞中含有EBV，需要在二級生物安全柜中操作；可作轉(zhuǎn)染宿主。

CHO-S細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Jurkat, Clone E6-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸??；細胞背景資料：急性T淋巴細胞白血?。荒行?/div>