"Lec1細胞：倉鼠卵巢細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Lec1 Cell

細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書

6341-92-0

很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。

Lec1細胞：倉鼠卵巢細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

OE33細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

melan-a細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：黑色素細胞；自發(fā)永生；C57BL/6

SNT8細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸??；細胞背景資料：NK/T細胞淋巴瘤；女性

WILL-2細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸?。患毎尘百Y料：彌漫大B淋巴瘤；女性

KATO Ⅲ細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：1)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細胞/毫升；2)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為1-5天，但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；3)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；4)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。

PL-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-H2126[H2126]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HUH-7.5細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：肝癌；男性

hRPTC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：近端腎小管；上皮細胞

B16-F0細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

FO細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Lec1細胞：倉鼠卵巢細胞

細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

目前，跟公司簽訂長期戰(zhàn)略合作伙伴的科研單位有山西中醫(yī)學院、福建醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院、上海市第六人民醫(yī)院、北京大學醫(yī)學部、同濟大學、四平中心醫(yī)院、廣州中醫(yī)藥大學、中科院上海生命科學研究院生化與細胞研究所、解放軍第306醫(yī)院、江南大學、西南醫(yī)院、吉首大學、西南大學化學化工學院、寧波大學、福建醫(yī)科大學附屬醫(yī)院、蘇州市同濟醫(yī)院、中南大學、延安大學附屬醫(yī)院、中國科學院上海藥物研究所、天津市兒童醫(yī)院、江蘇省中醫(yī)藥研究院、湘雅醫(yī)學院、第四軍醫(yī)大學預防系勞動與環(huán)境教研室、揚州大學、上海交通大學、中國醫(yī)科大學、浙江省立同德醫(yī)院、中國人民解放軍第150中心醫(yī)院、蘇州大學、四川大學華西醫(yī)院、云南大學、揚州大學獸醫(yī)學院、上海交通大學醫(yī)學院附屬第九人民醫(yī)院、海南醫(yī)學院、江蘇腫瘤醫(yī)院、上海市閔行區(qū)中心醫(yī)院、大連醫(yī)科大學附屬醫(yī)院、中國科學院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院、沈陽藥科大學、廣州市第八人民醫(yī)院、南京大學、浙江中醫(yī)藥大學、蘭州大學、上海中醫(yī)藥大學、中國農(nóng)業(yè)科學院飼料研究所、廈門市婦幼保健院、大學、南京軍區(qū)總醫(yī)院、天津市人民醫(yī)院、北京醫(yī)學科學腫瘤醫(yī)院、上海市同濟醫(yī)院、江蘇大學、桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院、中國科學院化學研究所

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Lec1細胞：倉鼠卵巢細胞

細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

傳代細胞培養(yǎng)注意事項：1)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；2)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：瘤細胞懸液接種1)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)80～100目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；3)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；4)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至10(7)～10(8)/ml；5)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位，＞10(6)細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。腹水瘤的建立與腹水瘤的接種：將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下：1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；2)消毒動物，左下腹穿刺接種1×10(6)腹水瘤細胞；3)接種腹水瘤細胞后約7-12d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用9號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽3-5ml；4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/div>