??????碧云天生產的Trizol是一種用于細胞或組織總RNA抽提的試劑。本產品采用和Invitrogen公司的TRIzol完全相似的原理和方法,抽提的方法和步驟完全相同。 ??????Trizol的顏色和TRIzol相同,加入氯仿后上層呈無色,下層呈紫紅色,便于吸取上層水相。 ??????Trizol對動植物細胞或組織及細菌的總RNA抽提均適用。 ??????Trizol可以抽提長達15 kb的RNA,也可以抽提microRNA等小RNA。抽提小RNA時宜-70℃沉淀過夜。 ??????Trizol抽提所得RNA無DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值為1.8-2.0。 ??????裂解細胞或和組織共勻漿時,Trizol可以保持樣品中RNA的完整性,即可以有效抑制RNA的降解。 ??????每一百萬細胞用Trizol抽提可得5-15μg RNA;每毫克組織用Trizol抽提可得1-10μg RNA。產量因細胞和組織不同而異。 ??????抽提兩個樣品約需一小時。 ??????Trizol抽提所得RNA可直接用于Northern,點雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase?protection?assay,cDNA克隆,以及RT-PCR;也可以用于基因表達芯片分析、高通量測序(deep sequencing)等對RNA質量要求較高的情況。 ??????碧云天生產的Beyozol(R0011)和Trizol(R0016)的成分有細微差別,實際抽提效果無任何顯著差異。 ??????每100ml Trizol可以抽提100個六孔板中的樣品或100個50-80mg的組織樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????4℃保存,一年有效。 注意事項:? ??????需自備氯仿,異丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。DEPC(ST036),DEPC水(R0021)可向碧云天訂購。 ??????所有離心管,槍頭及相關溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,然后滅菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比) diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或Milli-Q級水中,處理過夜,滅菌即成DEPC水。 ??????使用凍存的細胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細胞或組織差一些。因為在細胞或組織凍融過程中一些細胞或組織內的RNase會被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時抽提RNA,推薦先加入適量Trizol,并裂解樣品后凍存。 ??????必須戴一次性手套操作,且盡量不要對著RNA樣品呼氣或說話,以防RNA酶污染。建議戴一次性口罩操作。 ??????Trizol含有毒物質苯酚,避免接觸皮膚或吸入。為防止濺入眼睛,請戴防護眼鏡或使用透明保護屏。如皮膚接觸Trizol,請立即用大量去垢劑和水沖洗,如仍有不適,請聽取醫(yī)生意見。 ??????Trizol抽提總RNA的同時,理論上也可抽提蛋白和DNA,但未經測試。有興趣者可按Invitrogen公司的TRIzol的操作步驟進行操作。 ??????本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
碧云天生物技術有限公司
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