??????Western一抗二抗去除液(Stripping buffer),用于Western中轉(zhuǎn)移了蛋白的膜的重復(fù)利用。在Western中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測后,有時還需要檢測tubulin、actin等表達(dá)量相對穩(wěn)定的蛋白作為參照,或檢測其它蛋白進(jìn)行比較。通過使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用過的膜檢測其它蛋白。和重新跑一個SDS-PAGE膠相比,不僅省時省力,而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強(qiáng)。 ??????使用Western一抗二抗去除液多次重復(fù)使用同一張膜,會導(dǎo)致蛋白信號的減弱。但是,本W(wǎng)estern一抗二抗去除液,經(jīng)過多個抗體的檢測試驗(yàn),通常可以重復(fù)利用膜3-5次。 ??????使用本試劑只需大約20-30分鐘即可實(shí)現(xiàn)蛋白膜的重復(fù)使用,然后可以進(jìn)行封閉等后續(xù)的Western操作。 ??????碧云天生產(chǎn)的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除結(jié)合的一抗二抗的原理方面略有不同。分別依靠去垢劑、酸性、堿性、還原劑、螯合劑、鹽濃度以及一些特殊試劑等的不同組合來解除一抗二抗的結(jié)合,同時又不會導(dǎo)致轉(zhuǎn)移到膜上的蛋白的損失。 ??????關(guān)于Western一抗二抗去除液的選擇,一方面可以參考碧云天的相關(guān)網(wǎng)頁: ? ? ? http://www.beyotime.com/support/stripping-buffer.htm;另一方面也需要通過一些預(yù)實(shí)驗(yàn)來摸索的適合您實(shí)驗(yàn) 條件的Western一抗二抗去除液。 包裝清單:
保存條件: ??????4℃保存,一年有效。長時間不使用可以-20℃保存。 注意事項(xiàng): ??????使用辣根過氧化物酶(HRP),任何一次封閉(blocking)都應(yīng)當(dāng)使用5%脫脂牛奶,如果使用堿性磷酸酯酶,任何一次封閉都應(yīng)當(dāng)使用酪蛋白(casein)。 ??????為取得效果,推薦使用PVDF膜。但硝酸纖維素膜也可以使用本W(wǎng)estern一抗二抗去除液。 ??????使用ECL、BeyoECL等類似的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測適用本試劑。使用非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測,例如DAB,NBT/BCIP,不適用于本試劑。 ??????本W(wǎng)estern一抗二抗去除液有輕微腐蝕性,使用時請注意防護(hù)。 ? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。?
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