T7核酸外切酶作用于雙鏈DNA,沿5´→3´方向催化去除5´單核苷酸,它既能從5´末端起始消化,也能從雙鏈 DNA的切刻或缺口處起始消化。它既能降解5´磷酸化 DNA 也能降解5´去磷酸化DNA。據(jù)報道,它能沿5´→3´方向降解RNA/DNA雜交雙鏈上的RNA或DNA,但不能降解雙鏈或單鏈RNA。
單位定義
1單位指在50μl反應(yīng)體系,37℃條件下,30分鐘內(nèi)能從雙鏈DNA底物上催化產(chǎn)生1nmol的酸可溶性脫氧核糖核苷酸所需要的酶量。
組分
名稱 數(shù)量 T7 Exonuclease (10 U/μl) 100 μl/1 ml 10×T7 Exo Buffer 1 ml/1 ml×5
1 單位指在50μl反應(yīng)體系中,25℃條件下,30 分鐘內(nèi)能從雙鏈DNA底物上催化產(chǎn)生1 nmol的酸溶性脫氧核糖核苷酸所需要的酶量。
儲存
置于-20°C,可保存3年。
使用注意事項(xiàng)
1. 1×T7 Exo Buffer:50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃),25℃溫育。 2. 該酶的反應(yīng)溫度為25°C,75°C 20min可失活。
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