EHA105(pSoup)感受態(tài)細(xì)胞

價(jià)格	詢(xún)價(jià)
包裝	100 ul

最小起訂量	100 ul
發(fā)貨地	上海
更新日期	2024-11-05

產(chǎn)品詳情

中文名稱(chēng):EHA105(pSoup)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品類(lèi)別: 基因感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品規(guī)格（CAT#: LM1010）

EHA105 Elec： 50μl/支
pCAMBIA2301（control vector，10ng/μl ) 10μl
保存條件(保質(zhì)期)： -80℃（12個(gè)月）

EHA105 Electro感受態(tài)細(xì)胞基因型
C58 (rif^R) Ti pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) Succinamopine

EHA105 Electro感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品說(shuō)明

EHA105菌株由EHA101菌株改造而來(lái)，為C58型背景，核基因中含有篩選標(biāo)簽——利福平抗性基因rif，為了便于轉(zhuǎn)化操作，此菌株攜帶一無(wú)自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的琥珀堿型Ti質(zhì)粒pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)，此質(zhì)粒含有vir基因 (vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件，pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)質(zhì)粒自身的T-DNA轉(zhuǎn)移功能被破壞，但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體T-DNA順利轉(zhuǎn)移)。EHA105菌株適用于水稻、煙草等植物的轉(zhuǎn)基因操作。唯地生物開(kāi)發(fā)的EHA105電轉(zhuǎn)感受態(tài)特別適用于大質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化：經(jīng)pCAMBIA2301質(zhì)粒 (size:11633 bp)檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>10⁵cfu/μg DNA；經(jīng)pCAMBIA2301-ZH質(zhì)粒（size:40 kd）檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)5×10³cfu/μg DNA。

EHA105 Electro感受態(tài)細(xì)胞操作方法

1. 0.1 cm電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘，待其瀝干水分，正置5分鐘，使乙醇充分揮發(fā)，待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中，壓實(shí)冰面，電極杯頂離冰面0.5 cm以方便蓋上杯蓋，冰中靜置5分鐘充分降溫。

2. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)插入冰中5分鐘，待其融化，加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA（體積不大于6ul，感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率較高，次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量），用手撥打管底混勻，立即插入冰中，用200 μl槍頭將感受態(tài)-質(zhì)?；旌衔锟焖僖频诫姄舯?，蓋上杯蓋，空管保留待用。

3. 啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀，設(shè)置參數(shù)：C=25 μF，PC=200 ohm，V=2400 V（此參數(shù)為Biorad 推薦，使用者也可按所用電轉(zhuǎn)儀推薦的protocol操作），將電擊杯快速放入電轉(zhuǎn)槽中，電擊完成快速插入冰中，加入700 μl無(wú)抗生素的LB并轉(zhuǎn)移到感受態(tài)空管中，28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。

4. 6000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天

（當(dāng)平板只含有50 μg/ml kan 時(shí)，28℃培養(yǎng)48 h即可；平板中同時(shí)加入50 μg/ml kan，20 μg/ml rif 時(shí)，需28℃培養(yǎng)60 h；如果使用的平板含有50 μg/ml rif 則需要28℃培養(yǎng)72-90 h）。

備注

1、農(nóng)桿菌相關(guān)抗生素配方：

▼

▲

抗生素

配方

原液

工作液

羧芐青霉素（carb）

雙蒸水溶解，0.22 μm濾膜過(guò)濾除菌

50 mg/ml

50 μg/ml

硫酸卡那霉素（kan）

雙蒸水溶解，0.22 μm濾膜過(guò)濾除菌

50 mg/ml

50 μg/ml

鏈霉素（strep）

雙蒸水溶解，0.22 μm濾膜過(guò)濾除菌

10 mg/ml

50 μg/ml

利福平（rif）

DMSO溶解，0.22 μm濾膜過(guò)濾除菌

10 mg/ml

20 μg/ml

慶大霉素（gent）

雙蒸水溶解，0.22 μm濾膜過(guò)濾除菌

20 mg/ml

40 μg/ml

關(guān)鍵字： EHA105(pSoup)_感受態(tài)細(xì)胞_基因_

公司簡(jiǎn)介

上海聯(lián)邁生物工程有限公司（LMAI Bio)是一家經(jīng)營(yíng)生物、儀器、試劑、耗材等科研產(chǎn)品的高新技術(shù)生命科學(xué)公司，在廣大用戶(hù)的幫助和支持下，經(jīng)過(guò)不懈的努力，已成為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的一家供應(yīng)商，代理許多國(guó)際先進(jìn)水平的高科技產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國(guó)，在同行獲得一致好評(píng)。特別是生物試劑和細(xì)胞產(chǎn)品更是種類(lèi)齊全、價(jià)格實(shí)惠，美國(guó)原裝進(jìn)口原代細(xì)胞，專(zhuān)業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基，細(xì)胞培養(yǎng)用的相關(guān)試劑，氨基酸，抗生素，維他命類(lèi)產(chǎn)品品種齊全，試劑耗材種類(lèi)繁多。公司的規(guī)模和產(chǎn)品種類(lèi)日益擴(kuò)大和更新，我們一直秉承著代理優(yōu)質(zhì)品牌的產(chǎn)品，服務(wù)好每一位顧客，將

成立日期	2017-09-26 （8年）	注冊(cè)資本	100.000000萬(wàn)人民幣
員工人數(shù)	50-100人	年?duì)I業(yè)額	￥ 300萬(wàn)-500萬(wàn)
主營(yíng)行業(yè)	生化試劑,細(xì)胞培養(yǎng),蛋白組學(xué),分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué)	經(jīng)營(yíng)模式	貿(mào)易,工廠,試劑,定制,服務(wù)

上海聯(lián)邁生物工程有限公司

非會(huì)員

公司成立：8年
注冊(cè)資本：100.000000萬(wàn)人民幣
企業(yè)類(lèi)型：有限責(zé)任公司（自然人獨(dú)資）
主營(yíng)產(chǎn)品：技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓?zhuān)瑑x器儀表、機(jī)電設(shè)備、機(jī)械設(shè)備、玻璃制品、電子產(chǎn)品、一類(lèi)醫(yī)療器械
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