定量蛋白質組學方法也可以用label-free的方法,即非標記法。非標記蛋白質組定量質譜檢測的優(yōu)點就是樣品上機前,不需要特殊標記操作,操作非常方便,也節(jié)省了標記試劑的費用。結合使用Maxquant軟件進行分析,可以做到定量檢測。Maxquant軟件非標記定量分析是以MS1為基礎,實驗證明結合Maxquant軟件分析的非標記技術具有較好的定量準確性和可靠性??梢岳脽o標記蛋白質組學方法對各類復雜樣本提取蛋白及co-IP、Pull-down等中等復雜樣本進行蛋白鑒定與定量。對于復雜樣本蛋白鑒定數量通常在1千個以上。
◆ 蛋白質組學非標記定量分析的特點 1. 對液相色譜串聯質譜的穩(wěn)定性和重復性要求較高 2. 無需昂貴的標記試劑 3. 對樣本的數量無限制,克服了標記定量技術在對多個樣本進行定量方面的缺陷 質譜鑒定實驗流程(溶液內酶解)
使用儀器 Thermo Scientific Q Exactive, Q Exactive HF
技術優(yōu)勢 復雜樣本蛋白和中度復雜蛋白樣本均可以,如各類樣本提取蛋白或相互作用的蛋白質洗脫液; 高準確性, 高靈敏度。 實驗報告內容 1、差異蛋白結果(excel 列表);差異蛋白歸類(GO和KEGG分析)。 2、完整的實驗步驟、使用儀器、試劑來源、軟件檢索參數等。
樣品要求
實驗樣本預處理及運輸注意事項 為保證高質量的技術服務結果,請您參照以下說明對實驗樣本進行處理和保存: ⊙蛋白質溶液:定量并計算總蛋白量,密封好管口,干冰包裝寄送。
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