一、服務(wù)內(nèi)容
1.抗原準(zhǔn)備；
2.免疫Balb/C小鼠；
3.小鼠抗血清檢測（WB/ELISA檢測內(nèi)源性蛋白）；
4.檢測結(jié)果合格進(jìn)行細(xì)胞融合及細(xì)胞株的篩選、亞克隆、建立穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞株；
5.細(xì)胞株分泌抗體重鏈（Fcγ）亞型鑒定；
6.抗體擴(kuò)大生產(chǎn)、制備腹水以及Protein A/G純化。
二、抗原要求
1.蛋白抗原：蛋白總量>4mg、濃度＞1mg/ml、純度>85%、分子量>10KDa；
2.多肽抗原：多肽重量>4mg、純度>95%；
3.細(xì)菌等抗原：咨詢。
三、收費標(biāo)準(zhǔn)
步驟
時間
收費<span color:white;"="" style="box-sizing: border-box; font-size: 9pt;">
免疫
三次免疫后（效價達(dá)不到融合要求繼續(xù)免疫）測尾血效價
10周
免疫5只Balb/c小鼠，免疫量100ug/只,最終達(dá)到融合效價>1:10000
￥2000
融合
采用已優(yōu)化的條件進(jìn)行高效融合
1天
取脾臟分離成單細(xì)胞與對數(shù)期的SP2/0按5：1混合，進(jìn)行細(xì)胞融合，20%胎牛血清，HAT選擇培養(yǎng)基，鋪10塊板
￥8000
上清 檢測
融合7天后，ELISA檢測，用檢測抗原包被ELISA板，二抗anti-mouse HRP，TMB顯色
陰性（正常培養(yǎng)基）OD<0.1陽性O(shè)D>0.5視為陽性孔
￥6000
亞克隆
對陽性孔采用有限稀釋法進(jìn)行亞克隆直到含有細(xì)胞的所有孔均為陽性
3周
ELISA檢測挑選OD值高的細(xì)胞孔，進(jìn)行后續(xù)亞克隆直到含有細(xì)胞的所有孔均為陽性
￥10000
定株
陽性穩(wěn)定的孔進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)
1周
擴(kuò)大培養(yǎng)上清，按客戶要求進(jìn)行功能檢測（WB/ELISA/IHC），滿足客戶要求后，將應(yīng)客戶要求交付3株細(xì)胞（每株細(xì)胞2管）
腹水
指定細(xì)胞株生產(chǎn)10mL腹水
離心后10mL腹水
￥4000
亞型
應(yīng)客戶要求測定細(xì)胞株亞型
測定重鏈和輕鏈亞型
純化
ProteinA或G純化10mL腹水
根據(jù)亞型選擇ProteinA或G
四、客戶提供材料
1.蛋白抗原、多肽抗原、細(xì)菌等；
2.抗原信息及相關(guān)文獻(xiàn)（可選）。
五、提交給客戶結(jié)果
1.實驗報告；
2.細(xì)胞株、抗體。
六、服務(wù)說明
1.多肽合成需要另行收費；
2.抗血清檢測如果不能達(dá)到我們的要求（1:10000以上），不進(jìn)行后續(xù)實驗服務(wù)；
3.特殊要求另行協(xié)商；
4.磷酸化、甲基化、乙酰基化等特殊修飾單抗另行協(xié)商。
5.最終提供10mg抗體，超過10mg，收費標(biāo)準(zhǔn)為100元/1mg.
北京索萊寶科技有限公司
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