??????碧云天的細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒(Membrane and Cytosol Protein Extraction Kit)提供了一種比較簡單、方便地從培養(yǎng)細(xì)胞或組織中抽提細(xì)胞膜蛋白和細(xì)胞漿蛋白的方法。抽提的膜蛋白不僅包括質(zhì)膜上的膜蛋白,也包括線粒體膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和高爾基體膜等上的膜蛋白。 ??????本試劑盒通過勻漿適度破碎細(xì)胞,經(jīng)低速離心去除細(xì)胞核和少數(shù)未破碎的細(xì)胞產(chǎn)生的沉淀,隨后取上清高速離心獲得細(xì)胞膜沉淀和含有細(xì)胞漿蛋白的上清,然后通過優(yōu)化的膜蛋白抽提試劑從沉淀中抽提獲取膜蛋白。 ??????約90分鐘即可完成培養(yǎng)細(xì)胞或組織的細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白的分離和抽提。抽提得到的蛋白可以用于SDS-PAGE,Western、酶活性測定等后續(xù)實驗。 ??????膜蛋白抽提試劑中含有蛋白酶抑制劑、磷酸酯酶抑制劑和EDTA等,后續(xù)不適合用于蛋白酶、磷酸酯酶等受這些抑制劑影響的酶的活性測定,但抽提獲得的膜蛋白或細(xì)胞漿蛋白適合用于檢測蛋白的磷酸化水平。 ??????本試劑盒按照本說明書的操作步驟可以抽提100個細(xì)胞或組織樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,一年有效。 注意事項: ??????需自備PMSF。PMSF一定要在抽提試劑加入到樣品中前2-3分鐘內(nèi)加入,以免PMSF在水溶液中很快失效。PMSF(ST506)可以向碧云天訂購。 ??????使用本試劑盒抽提到的細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白均可直接用碧云天生產(chǎn)的BCA法蛋白濃度測定試劑盒(P0009/P0010/ P0010S/ P0011/P0012/P0012S)測定蛋白濃度。抽提獲得的細(xì)胞膜蛋白不適合用Bradford法測定蛋白濃度。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
碧云天生物技術(shù)有限公司
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