??????總谷胱甘肽檢測(cè)試劑盒(Total?Glutathione?Assay?Kit)是一種簡(jiǎn)單易行的檢測(cè)總谷胱甘肽(GSSG+GSH)的試劑盒。通過(guò)谷胱甘肽還原酶把氧化型谷胱甘肽(GSSG)還原成還原型谷胱甘肽(GSH),而GSH可以和生色底物DTNB反應(yīng)產(chǎn)生黃色的TNB和GSSG。適當(dāng)配制反應(yīng)體系,前后兩個(gè)反應(yīng)合并起來(lái)后,總谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相當(dāng)于一個(gè)顏色產(chǎn)生的限速因素,總谷胱甘肽的量就決定了黃色的TNB形成量。從而通過(guò)測(cè)定A412就可以計(jì)算出總谷胱甘肽的量。 ??????本試劑盒的具體反應(yīng)原理如下:
??????兩個(gè)反應(yīng)相合并:
??????還原型谷胱甘肽是絕大多數(shù)活細(xì)胞中巰基的主要來(lái)源,對(duì)于維護(hù)蛋白巰基適當(dāng)?shù)难趸€原狀態(tài)有重要作用,并且是動(dòng)物細(xì)胞中關(guān)鍵的抗氧化劑??偣入赘孰闹型ǔ?0-95%為還原型谷胱甘肽。 ??????本試劑盒可以檢測(cè)動(dòng)物組織、血漿、紅細(xì)胞、和培養(yǎng)細(xì)胞或其它適當(dāng)樣品中總谷胱甘肽的含量。 ??????本試劑盒提供了蛋白去除試劑S,可以更加準(zhǔn)確地測(cè)定出含有蛋白的樣品中的總谷胱甘肽的量。 ??????本試劑盒的檢測(cè)下限為1μM。一個(gè)試劑盒共可以進(jìn)行100次檢測(cè)。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,一年有效。還原型谷胱甘肽配制成溶液后,需適當(dāng)分裝,-20℃保存至少3個(gè)月有效。DTNB溶解在DMSO中后,需適當(dāng)分裝,-20℃保存至少3個(gè)月有效。蛋白去除試劑S配制成溶液后可以4℃保存。NADPH溶解后,適當(dāng)分裝,-70℃保存。 注意事項(xiàng): ??????本試劑盒檢測(cè)時(shí)牽涉到氧化還原反應(yīng),所有氧化劑或還原劑都會(huì)干擾本試劑盒的測(cè)定。特別是DTT、巰基乙醇等含有巰基的試劑會(huì)嚴(yán)重干擾本試劑盒的測(cè)定,請(qǐng)盡量避免。 ??????一定要嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)的溫度和反應(yīng)時(shí)間,否則需每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。 ??????NADPH等試劑不太穩(wěn)定,要嚴(yán)格按照后續(xù)說(shuō)明操作,謹(jǐn)防失活。 ??????DMSO在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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