蔗糖合成酶(合成方向;SS-Ⅱ)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法 100管/48 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
蔗糖是源(葉片等)光合產(chǎn)物向“庫(kù)”器官運(yùn)輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13) 是雙向反應(yīng)酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代謝的關(guān)鍵酶之一。研究其合成方向 SS-Ⅱ 的活性對(duì)于植物蔗糖合成具有重要意義。
測(cè)定原理:
SS-Ⅱ催化游離果糖與葡萄糖供體 UDPG 反應(yīng)生成蔗糖,蔗糖與間苯二酚反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化,在 480nm 下有特征吸收峰,酶活力大小與顏色的深淺成正比。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液), 進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
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