產(chǎn)品描述
1)本產(chǎn)品是”Ready to Use”即用型RT- RPA凍干顆粒;含有除引物和探針外所有的反應(yīng)要素,凍干顆粒中包含成分如下:重組酶,聚合酶,單鏈結(jié)合蛋白,ATP,dUTP,dATP,dCTP,dGTP,poly A,TET和PEG 35000等。
2)反應(yīng)需要14mM 醋酸鎂,請與RPA顆粒一起溶解,或根據(jù)客戶需要添加醋酸鎂緩沖液。
3)擴增產(chǎn)品電泳分析,請務(wù)必提取核酸;產(chǎn)品直接電泳,大概率觀察不到條帶。
4)“基礎(chǔ)型”適合電泳分析和后續(xù)CRISPR檢測,“熒光型”含有外切酶或NFO適用熒光探針或試紙條,不適合后續(xù)CRISPR分析。
5)RT-RPA擴增試劑可用檢測DNA或RNA。
6)若使用核酸釋放劑(主要成份為0.5% Triton X-100 或CA-63,pH=8.0),可直接溶解球使用;可任何比例與樣本混溶,釋放核酸推薦2:1與未處理樣本混合后再溶解RPA球。
7)引物建議用Beacon Designer 軟件設(shè)計引物和探針;引物長度28~35堿基,探針優(yōu)選45個堿基。
8)試劑盒最低檢測下限為10-100 copies/測試(依據(jù)引物篩選優(yōu)化程度和檢測手段)。
注意事項
1)開始檢測前請仔細閱讀本說明書全文,并嚴格按照要求進行操作。
2)不同類型樣品所提取的核酸含量和純度有差異,可能導致擴增效率不同。
3)當實驗室環(huán)境、試劑、儀器或配件存在陽性物質(zhì)(例如質(zhì)粒、擴增產(chǎn)物等)污染,或樣本間存在交叉污染的情況時,會影響檢測結(jié)果準確性,出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
4)務(wù)必保證試劑保存、配制或運輸?shù)卯?,否則可能導致試劑檢測性能下降,出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
5)陽性對照為質(zhì)粒,適用于評價本試劑核酸擴增性能。
6)請嚴格按照基因擴增實驗室的管理規(guī)范進行操作。 實驗結(jié)束后,檢測過程中所產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)按照相關(guān)規(guī)范進行處理。
關(guān)鍵字: RPA;
琿信生物是華東醫(yī)藥(股票代碼:000963)旗下全資子公司,公司總部及生產(chǎn)基地位于杭州市,在上海市設(shè)有營銷中心。公司專注于mRNA藥物、體外診斷、細胞基因治療等產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料,并致力于向全球客戶提供GMP級質(zhì)粒DNA、mRNA、抗體及重組蛋白藥物等CDMO整體解決方案。核心原料包括常規(guī)/修飾NTPs、mRNA帽類似物、dNTPs等合成砌塊,T7 RNA聚合酶、RNA酶抑制劑、熱啟動DNA聚合酶、MMLV反轉(zhuǎn)錄酶等高端生物酶以及GMP級細胞因子?,q信生物一直踐行“成就客戶,產(chǎn)品至上,雷厲風行,合作共贏”的企業(yè)價值觀,向全球客戶提供符合國際標準的上游原料,為生物藥企提供從研發(fā)到商業(yè)化生產(chǎn)全流程一站式CDMO解決方案。
公司建立了近6,000平方GMP級大分子潔凈生產(chǎn)車間,配制設(shè)備均為Cytiva、Bosch、Agilent等國際一流品牌,軟硬件已達國際先進水平。公司具備20-200L哺乳動物細胞獨立生產(chǎn)線、3,500L畢赤酵母獨立生產(chǎn)線、3,500L大腸桿菌獨立生產(chǎn)線、西林瓶和卡式瓶商業(yè)化灌裝線、40-400立方數(shù)條進口真空冷凍干燥生產(chǎn)線?,q信生物提供包括早期工藝研究、生產(chǎn)工藝開發(fā)與優(yōu)化、中試與臨床樣本生產(chǎn)、商業(yè)化生產(chǎn)、檢驗方法開發(fā)等服務(wù),可承接國內(nèi)外mRNA、抗體及重組蛋白藥物委托研發(fā)和生產(chǎn)。琿信生物具備完善的GMP生產(chǎn)和質(zhì)控體系,在質(zhì)量合規(guī)方面有豐富的經(jīng)驗。國際化新藥注冊文件體系和中英文文件體系能夠滿足中美雙報要求。