鏈酶親和素（提供GMP級&科研級）

鏈霉親和素是一種最初是從親和鏈霉菌中分離出來的生物素結(jié)合蛋白，鏈霉親和素優(yōu)于親和素，因?yàn)樗谥行?/span>pH值下幾乎沒有凈電荷，且不含碳水化合物，并表現(xiàn)出較低水平的非特異性結(jié)合。重組鏈霉親和素是一種分子量約為53kDa的四聚體蛋白，由分子約為13kDa的4個亞基組成。每個亞基包含一個單一的生物素結(jié)合位點(diǎn)，并有6個酪酸殘基，純化的重組鏈霉親和素可用于生物素化抗體等探針的多種標(biāo)準(zhǔn)檢測方法，包括免疫印跡、ELISA、免疫組化和熒光成像。

基礎(chǔ)參數(shù)

純度展示

使用方法

一、 微孔板包被

1. 用碳酸鈉緩沖溶液（pH 9.6）溶解凍干粉，將濃度稀釋成 3-10μg/mL（客戶可設(shè)定梯度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)） 

注意：由于 SA 等電點(diǎn)是 7.4，包被不建議使用中性緩沖液。

2. 用移液器吸取 100μL/孔，4℃過夜包被或者 37℃包被 2h；

3. 洗滌：倒盡板孔中液體，加 200μL 洗滌液，靜放三分鐘，反復(fù)三次，最后將反應(yīng)板倒置在吸水紙上，使孔中洗滌液流盡，扣干。

4. 后續(xù)進(jìn)入封閉、洗滌、抗原抗體結(jié)合流程

若不立即進(jìn)入下游實(shí)驗(yàn)，包被板需要進(jìn)行烘干保存時(shí)。包被前，將包被液中加入 20%蔗糖作為活性保護(hù)劑。

二、 SA 偶聯(lián)磁珠

2.1 NHS 活化

1.充分混勻磁珠后，取 100μL PangoBeads COOH 磁珠到 1.5 mL 離心管中，置于磁性分離上，待固液分離后去除上清液；

2.取 200μL MES 溶液（25mM，pH 5.0）加入到離心管中，置于磁性分離上，待固液分離后去除上清液。重復(fù)該步驟 1 次；

3.迅速加入新配制的 50μL EDC 溶液和 50μLNHS 溶液 （均為 50mg/mL，以上述 MES 配制）到裝有磁珠的離心管中，漩渦混勻使磁珠充分懸浮，室溫下垂直混合 30min；

4.反應(yīng)結(jié)束后，加入 100μL上述 MES 溶液洗滌 2 次；（活化狀態(tài)不宜長時(shí)間保存，建議立即進(jìn)行偶聯(lián)）

2.2 蛋白偶聯(lián)

1.將離心管置于磁性上，分離去除上清液，加入 100μL蛋白溶液（25 mM MES，pH 5.0）輕柔地混勻；（蛋白濃度在 0.1-2.0mg/mL）

2.在室溫下垂直混合反應(yīng) 2h，或在 4℃條件下垂直混合過夜；

3.反應(yīng)結(jié)束后將離心管置于磁分離架上，磁性分離去除上清液，加入 1mL 乙醇胺溶液（3M，pH9.0）洗滌磁珠 2 次；

4.加 1mL 乙醇胺溶液（3M, pH 9.0）于離心管中，渦旋 30s，將離心管置于垂直混合儀中室溫反應(yīng) 1-2h；

5.反應(yīng)結(jié)束后，將離心管置于磁力架上，待固液分離后移除上清液，然后加入 100μL 純化水輕柔渦旋 30s，磁吸分離，重復(fù)該步驟 1 次；

6.加入適量的保存液（可根據(jù)需要來確定保存溶液的加入量，以調(diào)整偶聯(lián)配體磁珠的加入適量的保存液（可根據(jù)需要來確定保存溶液的加入量，以調(diào)整偶聯(lián)配體磁珠的濃度）保存于 4℃，如果固定的生物配體穩(wěn)定，可以在保存溶液中加入 0.02%（W/V）疊氮化鈉作為抑菌劑。

運(yùn)輸和儲存

 本產(chǎn)品-30 ~ -15℃保存，≤0℃運(yùn)輸，可在-15℃~ -25℃保存。

 注意事項(xiàng)

1.凍干粉溶解后應(yīng)避免反復(fù)凍融，建議分裝成小包裝后分別凍存；

2.溶解后立即使用效果最好，不能 4°C 長期存放；

3.凍干粉中含 20mM Na2CO3 pH9.5 的緩沖體系，若用于包被，酶標(biāo)可以直接使用；

4.若用于 ELISA 或 CLIA 固相載體包板和硝酸纖維素膜劃線包被，需要烘干保存的，包被液或緩沖液中需加入 20%蔗糖作為活性保護(hù)劑。