乳酸脫氫酶（Lactate Dehydrogenase，LDH）試劑盒說明書

分光光度法50管/24樣

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

LDH（EC 1.1.1.27）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是糖酵解途徑的末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng)，伴隨著 NAD+/NADH 之間互變。

 測定原理：

LDH 催化 NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進一步與 2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中顯棕紅色，顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。

自備儀器和用品：

可見分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣品測定的準備：

1、細菌、細胞或組織樣品的制備：細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為 1000~5000：1 的比例（建議 2000 萬細菌或細胞加入1ml 提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1ml 提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

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