一、產(chǎn)品描述
慢反應(yīng)探針（Slow-response probes），包括陽離子羰花青、羅丹明和陰離子氧鎓醇（Oxonols），都用來檢測不可興奮細(xì)胞因呼吸活性、離子通道滲透和其他因素引起的平均膜電位變化。
DiBAC4(3) (Bis-(1,3-Dibutylbarbituric Acid)Trimethine Oxonol)，是一種慢反應(yīng)的膜電位敏感探針，隨著膜電位變化在細(xì)胞膜內(nèi)進(jìn)行重新分配。當(dāng)染料由于膜的去極化進(jìn)入細(xì)胞膜，熒光增強(qiáng)且往紅色光譜遷移。
DiBAC4(3)對膜電位變化的熒光反應(yīng)速率通常比苯乙烯染料（比如Di-4- ANEPPS）慢，但熒光信號變化較大（通常~1% fluorescence change/mV）。
DiBAC染料由于總負(fù)電荷被線粒體所排斥，使其在質(zhì)膜電位測定上相較于羰花青染料表現(xiàn)較好。
DiBAC4(3)可用于流式實驗中監(jiān)測防御素的活性。
二、物理參數(shù)
【英文名稱】：Bis(1,3-dibutylbarbituric acid) trimethine oxono（簡稱：DiBAC4(3））
【中文名稱】：雙(1,3-二巴比妥酸)-三次甲基氧烯洛爾
【CAS NO】：70363-83-6
【分子式】：C27H40N4O6
【分子量】：516.64 g/mol
【熔點】：>200℃
【沸點】：614.3±65.0 °C
【密度】：1.201±0.06 g/cm3
【酸度系數(shù)(pKa)】：4.80±0.20
【形態(tài)】：橙色固體
【Ex/Em】：493/516 nm
【溶解性】：溶于DMSO、DMF
【純度】：≥95%
【儲存條件】：-20℃避光干燥
三、生物活性
體外研究
用DiBAC4(3)清楚地觀察到HEKBKα中10μM伊文思藍(lán)(EB)誘導(dǎo)的膜超極化,而加入3mM四乙基氯化銨(TEA)的膜電位(MP)變化比用微電極測量的慢。通過微電極和DiBAC4(3)的測量,超極化峰值的時間分別為2.3±0.9 s(n = 4)和35.0±2.6 s(n = 12,P <0.01)。
細(xì)胞實驗
在熒光測量之前，將細(xì)胞在含有100nM DiBAC4（3）的KRH（Krebs-Ringer-HEPES）緩沖液中在室溫下孵育20分鐘。染色的細(xì)胞無需洗滌即可用于實驗。使用505nm雙色鏡和BA濾光器（> 520nm）收集熒光發(fā)射。
四、注意事項
實驗調(diào)整：需根據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整染料濃度和孵育時間，以減少對細(xì)胞的影響；
干擾因素：部分化合物可能干擾檢測，實驗時可選用緩沖液替代培養(yǎng)基。
安全避光：熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光；操作時請穿實驗服并戴一次性手套。
關(guān)鍵字： 70363-83-6;DiBAC4(3）;DiBAC4(3) 膜電位熒光探針;
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