產(chǎn)品描述
ER-Tracker Green是一種藥物熒光偶聯(lián)物，即BODIPY? FL標(biāo)記的格列苯脲（BODIPY? FL Glibenclamide）。
格列本脲，又名優(yōu)降糖（Glyburide），是一種磺酰脲類口服降糖藥，用來調(diào)查胰島素β細(xì)胞活性和胰島素分泌，以及研究心肌細(xì)胞功能和心律失常。
格列本脲能夠結(jié)合內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上突出的ATP敏感性鉀通道（KATP）的磺脲類受體。格列本脲的藥理學(xué)活性可能影響內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能。
某些特定細(xì)胞上磺脲類受體的可變表達(dá)可能引起非內(nèi)質(zhì)網(wǎng)標(biāo)記。激發(fā)/發(fā)射波長~504/511nm，光譜特性類似于傳統(tǒng)的FITC，與檢測該染料的標(biāo)準(zhǔn)濾片兼容。
參數(shù)信息
英文名稱：ER-Tracker Green for live-cell imaging
分子式：C37H42BClF2N6O6S
分子量：783.0952
狀態(tài)：液體
Ex/Em：504/511nm
檢測濾片：FITC
純度：≥95%
儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥
注意事項(xiàng)
熒光染料均存在淬滅問題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
格列本脲的藥理學(xué)活性可能會(huì)影響內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的一些功能；某些特殊細(xì)胞中磺脲類受體的可變表達(dá)可能會(huì)導(dǎo)致非內(nèi)質(zhì)網(wǎng)特異性染色。
ER-TrackerGreen可用于活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的熒光染色，但不適合用于固定細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的熒光染色。
如果經(jīng)ER-TrackerGreen染色后的細(xì)胞需要進(jìn)行固定操作，使用4%多聚甲醛在37C固定2分鐘。
ER-Tracker Green染色后的細(xì)胞不能用TritonX-100通透，TritonX-100通透處理會(huì)導(dǎo)致ER-TrackerGreen的熒光染色消失。
使用說明
1.ER-Tracker Green工作液的配制:
a.取少量ER-TrackerGreen按照1:100o的比例加入到ER-Tracker
Green稀釋液中。例如取1μlER-Tracker Green加入到1ml ER-TrackerGreen稀釋液中。混勻后即為ER-Tracker Green工作液。
b.ER-TrackerGreen工作液使用前需37°C預(yù)溫育。
【注】：工作液中ER-TrackerGreen的濃度可以根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整，稀釋比例調(diào)整范圍為1:1000-1:3000。
為降低背景，在染色效果可以接受的范圍內(nèi)，建議盡量使用較低濃度的ER-Tracker Green。
2.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的熒光標(biāo)記：
a.去除細(xì)胞培養(yǎng)液，用溶液如HBSSwith Ca2+&Mg2+(Hanks'Balanced Salt Solutionwith Ca2+&Mg2+)洗滌生長在蓋玻片上的細(xì)胞。
注:對(duì)于懸浮細(xì)胞的染色可以參考貼壁細(xì)胞的染色方法進(jìn)行。
b.去除洗滌液，加入步驟1配制好的并37C預(yù)溫育的ER-Tracker Green染色工作液，與細(xì)胞37C共孵育15-30分鐘。
c.去除ER-TrackerGreen染色工作液，用細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞1-2次。
d.隨后通常用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡進(jìn)行觀察。此時(shí)可觀察到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈明亮的強(qiáng)熒光染色。
e.如果經(jīng)ER-TrackerGreen染色后的細(xì)胞需要進(jìn)行固定，可以使用4%甲醛37°C固定2分鐘。固定后用洗滌液洗滌2-3次，每次5分鐘，隨后可以進(jìn)行復(fù)染或滴加適當(dāng)?shù)目篃晒獯銣绶馄?，封片觀察。
【注】：ER-TrackerGreen染色的細(xì)胞不能用TritonX-100通透，TritonX-100通透處理會(huì)導(dǎo)致ER-TrackerGreen的熒光染色消失。
關(guān)鍵字： ER-Tracker Green;格列苯脲;ER-Tracker Green, fo;
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