人（女性）基因組 DNA 定量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為測量標(biāo)準(zhǔn)用于人（女性）基因組 DNA 的定量測量，還可用于 DNA 定量方法的驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制等領(lǐng)域。

一、樣品制備

本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是從永生化細(xì)胞系中提取、純化的全基因組核酸，稀釋至一定濃度后進(jìn)行分裝。一個(gè)包裝單元含有 50 μL 的基因組 DNA。

二、溯源性及定值方法

由 8 家實(shí)驗(yàn)室采用經(jīng)確認(rèn)的絕對(duì)定量方法-數(shù)字 PCR 方法對(duì)人基因組 DNA 定量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的目標(biāo)基因片段的拷貝數(shù)進(jìn)行測定，通過結(jié)果合并得到標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)值。通過使用滿足計(jì)量學(xué)特性要求、經(jīng)確認(rèn)的絕對(duì)定量測量方法和經(jīng)檢定/校準(zhǔn)的容量計(jì)量器具，確保本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量值溯源至可作為任何一個(gè)量制基本單位的實(shí)體數(shù)基本單位“一”（符號(hào)：1）以及體積的國家法定計(jì)量單位升（L）。

三、特性量值及不確定度

a以 14 號(hào)染色體上單拷貝保守基因核糖核酸酶 P H（1 Ribonuclease P RNA component H1 (RPPH1),RNase P）為代表確定的拷貝數(shù)濃度

所賦特性量值的不確定度由定值測量、均勻性和穩(wěn)定性引入的不確定度分量合成得到。

四、均勻性和穩(wěn)定性評(píng)估

參照 JJF1343 國家計(jì)量技術(shù)規(guī)范（等效 ISO 指南 35），采用數(shù)字 PCR 方法對(duì)該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)，結(jié)果表明均勻性良好，最小取樣量為 5 μL。按照先密后疏的原則采用數(shù)字 PCR 方法對(duì)該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行長期穩(wěn)定性考察，標(biāo)準(zhǔn)值無方向性變化并通過平均值一致性檢驗(yàn)，表明穩(wěn)定性良好，并通過運(yùn)輸穩(wěn)定性研究確定了標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的運(yùn)輸條件。

本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)自定值日期起，有效期為 4 年，研制單位將繼續(xù)跟蹤監(jiān)測該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性，有效期內(nèi)如發(fā)現(xiàn)量值變化，將及時(shí)通知用戶。

五、包裝、儲(chǔ)存及使用

1.包裝、儲(chǔ)存和運(yùn)輸：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用 0.5 mL 立式擰口塑料離心管包裝，50 μL/瓶。本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用干冰或冰袋運(yùn)輸，建議-70?C 低溫長期保存。

2.使用注意事項(xiàng)：使用前應(yīng)先從冰箱內(nèi)取出，平衡至室溫后離心再打開瓶蓋使用。樣品完成取樣后，應(yīng)盡快恢復(fù)密封狀態(tài)。

3.使用建議：當(dāng)使用熒光定量 PCR 方法(qPCR)對(duì)工作標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行賦值時(shí)，建議用戶先用本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對(duì) qPCR 方法進(jìn)行校準(zhǔn)。對(duì)非性別特異性的 qPCR 方法，需使用 GBW09856 和 GBW09857 兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分別作標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行校準(zhǔn)，以避免不同DNA材料和特異性qPCR 方法之間存在可能的干擾。